灰飞虱体内共生菌Wolbachia的groEL基因克隆及序列分析.pdf

第 31卷第4期 南京师大学报 (自然科学版) Vo1．31No．4 2008年 12月 JOURNALOFNANJINGNORMALUNIVERSITY(NaturalScienceEdition) Dec，2008 灰飞虱体 内共生菌 Wolbachia的groEL 基因克隆及序列分析 季英华，史文琦，程兆榜，周 彤，林 玲，范永坚，周益军 (江苏省农业科学院植物保护研究所，江苏 南京210014) [摘要】 利用特异性引物，首次在国内克隆获得灰飞虱(LaodelphaxstriateUusFallrn)体内共生菌 Wolbachia的 gmEL基因全长序列 ，其开放阅读框为1659bp，可编码552个氨基酸 ，GenBank登录号为：EF468716，与已发布的 韩国分离物核苷酸一致性达99．9％，为进一步研究其与灰飞虱传播水稻条纹病毒的关系奠定了基础． [关键词】 灰飞虱，共生菌，Wolbachia，序列分析，goEL [中图分类号]$435 [文献标识码]A [文章编号]1001-4616(2008)04-0119-05 CloningandSequencingofgroEL From WolbachiaEndosymbiont inLaodelphax striatellusFall6n JiYinghua，ShiWenqi，ChengZhaobang，ZhouTong，LinLing，FanYongjian，ZhouYijun (InstituteofPlantProtection，JiangsuAcademyofAgriculturalScience，Nanjing210014，China) Abstract：GroELgenefrom Wolbachiaendosymbiontinsmallbrownplant—hopper(LaodelphaxstriatellusFallrn)，was amplifiedbyPCR andcloned．Thecompletednucleotidesequenceofthegenewasdetermined，whichwasthefirstreport inChina．Ithas1659bpnucleotidesandencodes552aminoacids．GenBankaccessionnumberisEF468716．Compar- isonshowedthatthisgenehad99．9％identitiesonnucleotidesleveltoDQ356890．anisolaterfomSouthKorea．Based onthissequence，FurtherresearchesonfunctionofgroEL，suchasitsrelationtoricestripevirustransmission，canbe carriedout． Keywords：Laodelphaxstriatellus，endosymbiont，Wolbachia，sequenceanalysis，gr0EL 灰飞虱(LaodelphaxstriateUusFallrn)是水稻上一种重要的害虫，近年来 由它传播的水稻条纹病毒 (Ricestripevirus，RSV)在我国稻区大流行，给当前水稻生产造成了严重的危害 ¨．目前对于该病已有较 多研究，但是对于灰飞虱与水稻条纹病毒之间相互作用的研究还较少，再加上灰飞虱对水稻条纹病毒为持 久型经卵传播，其传毒机制至今尚未明确． 1986年，Toriyama利用显微镜技术在灰飞虱的雌雄生殖器官内观察到 RSV病毒颗粒和菌胞，并推测 灰飞虱的成熟卵是通过菌胞的途径获得病毒粒子并将其传递给下一代的E2]．2001年吴爱忠等人对灰飞虱 体 内RSVSP(disease—specificprotein)亚细胞定位研究时也发现：带毒雌虫卵巢和卵内都观察到菌胞和胶 体金；无毒雌虫卵巢和卵内只观察到菌胞；雄虫无论带毒与否，其精子 内无菌胞也无胶体金 ；这也暗示 了菌胞和RSV在经卵传播这个过程中