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应用与环境生物学报 2o08,14(6l745~749 2008.12.25
DOI:1O_3724/SPJ1145.2OO8.OO 5
chinJApplEHvironBiol=ISSN 10o6—687x
C0nstructi0n0fTwin11_DNA 、厂ect0rEnc0dingHairpinRNA T1argeting
theReDlicaseGene0fBarleVYelU0w DwarfVirus‘
SUN Wenyu一,CHEN Jing,WANG Lei” FU Tihua。
( P D厂 蛔 加eec日出 0厂&f cP,chengdu61004l,china)
(Bf0fPc 0 gy 已 口 fff甜 c feP c如, grfc “阳,cfPncP,Being100O81,china)
(,c,rD厂 rfc , c “ 』4譬rfc““,,L7fve,打y,Ya’an6250l4,Sichuan,China)
Abstract RNAinterference(RNAi)technologyhasbecomethemostefflectiveapproachf0rgeneticallyengineeringVirus
resistanceinplants.Here,weconstructedahairpinRNA (hpRNA)一expressingRNAiVectortargetingthereplicasegeneof
aChineseiso1ateofba订eyyel1owdwarfvirus(BYDV),BYDV—GAv.ThisconstructwascoII]-prisedoftwotandem r.DNAs
(twinT-DNAs),oneofwhichcontainedthehygromycinresistancegene fastheselectablemarker,andtheotherc0ntained
theexpressiOncassetteencodinghpRNA ofthepo1ymerasegenesequenceofBYDV—GAv.ThistwinT-DNA cOnstructshould
aU0w theprOductionofse1ectab1emar1(er-freetransgenicplantsthatareresistanttoBYDV—GAV Fig6,Ref2l
Keywordsbarleyye11owdwarfvirus(BYDV);RNAi;twin1DNAsVector;marke卜freeplant
CLC O78:S512_303
具双T_DNA区的大麦黄矮病毒复制酶基因RNAi
植物表达载体的构建木
孙文瑜,s陈静 王磊z料付体华
(中国科学院成都生物研究所 成都 610041)
(中国农业科学院生物技术研究所 北京 100081)
r四川农业大学农学院 雅安 625叭4)
摘 要 RNAi系双链RNA诱导同源mRNA降解,导致特定基因表达沉默的一种现象.RNAi技术是通过基因工程防治
植物病毒病的最佳途径.由大麦黄矮病毒(Barelyyellowdwarfvirus,简称BYDV)引起的禾谷类黄矮病发病面积和危害
程度在我国呈加重趋势.BYDv—GAv是当前流行的大麦黄矮病毒株系,本文针对BYDV.GAV复制酶基因序列
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