山东省某规模化兔场皮肤真菌病的快速诊断.pdfVIP

山东农业大学学报 (自然科学版)，2011，42 (3)：428—432 JournalofShandongAgriculturalUniversity(NaturalScience) 山东省某规模化兔场皮肤真菌病 的快速诊断 崔丽娜 ，2，牛钟相 ，姜文学。，杨丽萍 ，高淑霞。 (1．山东农业大学动物医学院，山东泰安 271018；2．山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室，nj东 泰安 271018 3．山东省农科院畜牧兽医研究所 ，山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东 济南 ~oi0o) 摘要：为了鉴定某规模化兔场发生皮肤真菌病的病原，并为家兔皮肤真菌病的快速检测提供一种分子生物学方 法。根据皮肤真菌特异性rDNA序列设计通用引物(5一CACCGCCCGTCGCTACTAC一3和5一1-I’rcGCTGCGT- TCTrCAT一3)，对已知分离株及其他微生物等进行特异性检测；应用该引物对所采取的种兔患部病料35份和 临床健康种兔的样本5份 ，进行PCR检测并克隆测序。该引物对四种常见病原性皮肤真菌分离菌株扩增出一 条在400bp一500bp之间的条带，其中红色毛癣菌和须癣毛癣菌为460bp，犬小孢子菌500hp，石膏样小孢子菌为 400bp，但对其它微生物和兔体细胞均未扩增出类似片段，说明具有特异性；对临床 35份病料中的33份均扩增 出一条460bp条带，为毛癣菌属，与测序结果一致。健康种兔的样品未扩增出类似片段。本研究利用通用引物 对家兔皮肤真菌病进行PCR检测并确定其主要病原，具有快速、简便和特异性强等特点，可用于大规模的家兔 皮肤真菌病的诊断。并具有重要的公共卫生意义。 关键词：家兔；皮肤真菌；通用引物；快速检测 中国分类号：s858．291 文献标识码：A 文章编号：1000—2324(2011)03—0428一o5 RAPID DIAG oSIS 0FlDEItM AToM YCoSES IN A LARGE SCALE RABBⅡ FARM OFSHANDoNG PRoVINCE CUILi—na · 。NIUZhong—xiang ，JIANGWen—xue’，YANGLi—ping，GAOShu—xia’‘ (I．CollegeofVeterinaryMdeicine，ShandongAgricultureUniversity，Taian271018，China； 2．ShandongProvincialKeyLaboratoryofAnimalBiotechnologyandDiseaseControl，Taian271018，China； 3．InstituteofAnimal ScienceandVeterinaryMedicineShna dongAcademyofAgriculturalSciences； ShandongProvincialKeyLaboratoryofAnimalDiseaseControl＆Breeding，Jinan，250100，China；) Abstract：(Purpose)Inordertoidentifyalarge—scalerabbitfarmfungalpathogenofskinandrabbitskinfor therapiddetectionoffungaldiseasetoprovideamoleculrabiologicalmehtods．(Mehtod)basedonrDNAso- quencesoffungalskin—specificprimers(5一CACCGCCCGTCGCTACIIAC一3and5一TITCGCTGCGTrCT- TCAT一3’，andohterknownisolatesspecificdetectionofmicroorgnaisms，etc．；applicationofhteprimerby takentocutoutdiseasedrabbitsand35samplesofclinicallyhealthyrbabits5copiesofthePCR detectionnad s