10株不同年代H9N2 AIV NA基因的克隆及序列分析.pdfVIP

n C T ^ A6RICULTURAE 华北农学报 ·2008，23(6)：5863 90REgLI—SIHI曲 10株不同年代 H9N2AIVNA基因的克隆 及序列分析 ， 杨大光 ，一，王新卫 ，王泽霖 ，周 欣 (1．河南农业大学 牧医工程学院 河南 郑州 450002；2．河南科技学院 食品学院，河南 新乡 453003) 摘要：利用RT．PCR技术克隆了10株涵盖不同分离年代和不同毒力的H9N2亚型AIV的NA基因，序列分析表明， 1O株 AIV的 NA基因的核苷酸和推导的氨基酸 同源性高，进化稳定。系统进化树分析表明，其 NA基因都属欧亚大陆 禽分支 ，H9N2流感病毒的分布与地域有相关性 。其 NA蛋 白氨基酸序列潜在 的糖基化位点以及氨基酸红细胞吸附位 点出现的变化 尚不能解释这些毒株生物学特性上 的差别 。但这些研究结果从理论上丰富了H9N2亚型禽流感 的分子 流行病学，也为进一步研究该类毒株 的进化提供了依据。 关键词 ：H9N2AIV；NA基 因；克隆；序列分析 中图分类号 ：$858．31；Q785 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—7091(2008)06—0058—06 CloneandSequencingofNA Genesof10H9N2AIV Strains thDifferentAges YANG Da．guang一，WANG Xin—wei，WANG Ze—lin ，ZHOU Xin (1．CollegeofAnimalHusbandryandVeterinary，HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou 450002，China； 2．DepartmentofFoodScience，HenanInstituteofScienceandTechnology，Xinxiang 453003，China) Abstract：NA genesof10H9N2AIV strains，which coverallisolatedagesanddiff~rentvirulence，wereclonedby RT—PCR．Thesequenceanalysisshowedthehomoloyg ofnucleotidesofNA genesandtheirdeducedaminoacidsbetween the10AIV strainswas91．6％ 一99．0％ and91．9％ 一100％ ，respectively，indicatingthesteadevolutionofthesechick— en-sourceH9N2AIV strains．PhylogeneticanalysissuggestedthattheNA genesoftheseH9N2AIVsbelongedtoeurasia cladenadtheirdistributiondisplayedacertainregional correlation．rhechangesofpotentialglycosylationsitesandcry- thmeyteadsorptionsitesofthe 10strainscouldnotexplainthedifiefenceoftheirbiologicalcharacteristics．，I1heresultof thisresearchnotonlyenrichedthemolecularepidemioloyg ofH9N2subtypeAIV，butalsoprovidedthescientificbasefor furtherstudyingtheevolutionofthem ． Keywords：H9N2AIV；NA gene；Clone；Sequenceanalysis H9N2亚型禽流感病毒 (AIV)是欧亚大陆存在 的 进行神经氨酸酶 (NA)基因的克隆和序列分析 ，研究 主要禽流感病毒。其变异频率很高 ，同一亚型内毒株 NA基 因茎部缺失情况和基因的进化情况 ，对潜在 间的致病力存在差异，同一毒株感染不同宿主时致病