FMDV OA/58病毒株VP3蛋白结构的模拟与分析.pdfVIP

FMDV OA/58病毒株VP3蛋白结构的模拟与分析.pdf

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n C T ● iIBRICULTURAE 华北农学报 ·2008,23(6):28.31 BOREALI—SIHICli FMDVOA/58病毒株 VP3蛋 白结构 的模拟与分析 周建华,丛国正,高闪电,常惠芸 (中国农业科学院 兰州兽 医研究所 ,家畜疫病病原生物学国家重点实验室 , 农业部畜禽病毒学重点开放实验室,国家 口蹄疫参考实验室 ,甘肃 兰州 730046) 摘要:以口蹄疫病毒株 0A/58RNA为模板,反转录并扩增 目的eDNA ,然后与pMD18一T载体连接并转化 JM109菌 株,提取 的重组质粒用凝胶 电泳 、PCR和 BarnHI、HindIII双酶切法鉴定。分析表 明,口蹄疫病毒 VPI、VP2、VP3和 VP4 在核苷酸水平上的变异率是无差异的(P0.05);而它们在氨基酸水平上的变异率差异显著(P0.05)。该毒株与 20 株源于GenBank中的VP3氨基酸序列 比较发现其保守区主要位于第 1~24、26~35、37~43、45~57、61~122、124 173、 175~209、211~220位 。运用同源模建,0A/58VP3蛋 白三维空间结构可分为 A,B,c3个结构区域。保守区氨基酸残 基在维持 VP3蛋白的空间构象和功能方面具有重要作用。 关键词 :口蹄疫病毒 ;VP3蛋 白;同源模建 中图分类号 :Q945 文献标识码 :A 文章编号 :1000—7091(20o8)O6—0028—04 ConstructionandAnalysisofVP3Proteinfrom A Foot..and..mouth DiseaseVirusStrain OA /58 ZHOUJian—hua,CONG Guo—zheng,GAOShan—dian,CHANG Hui-yun (ChineseAcademyofAgricultureScience,StateKeyLaboratoryofVeterinaryEtiologicalBilogy,KeyLaboratory ofAnimalVirologyofMinistryofA culture,NationalFMDReferenceLaboratory,I~nzhou 730046,China) Abstract:Foot—and—mouthdiseasevirusstrain0A/58RNAswereusedastemplatesforRT—PCR.TheamplifiedcD. NAproductswereclonedintopMD18-TvectorsandtransformedintoJM109.T}lerecombinantplasmidswereidentifiedby electrophoresis,PCR ,andanalysisoftow cleavageswith BarnH IandHindIII.Afteranalyzingthedifferenceamong VP1,VP2,VP3,VP4,atthenucleotidelevel,themutationratesofthese4encodingsequenceswerenodifference(P 0.05),however,attheaminoacidlevel,thosemutationratesweredifferent(P0.05).Theregionsof1—24th,26— 35th,37—43th,45—57th,61—122th,124—173th,175—209thand211—220thinVP3proteinmostprobablyare conservative.DependingonhomologymodelingtheFMDV strain0A/58VP3protein,the3D moldwasgained.Andthis 3DmoldwasdividedintoA,BandCregions.ThisresearchshouldbeusedasaninstructioninordertodirecttheWOrk onFMDV VP3protein. Keywords:Foot—and—mouthdisea

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