珍稀濒危植物珙桐初代培养影响因素研究.pdfVIP

江苏农业科学 2008年第6期 一 83一 珍稀濒危植物珙桐初代培养影响因素研究 杨锋利，苏智先，杜保国，胡进耀，邹丽娟 (四川省生态学与环境保护技术重点实验室／绵阳师范学院园林科学研究所，l~lJq绵阳621000) 摘要：以室内培养的珙桐带芽茎段为外植体，采用不同的消毒方式，通过正交设计研究了基本培养基、6一BA、NAA以及培养温度 对珙桐初代培养的影响。结果表明：用70％酒精浸泡30s，0．1％升汞浸泡3rain消毒效果较好。培养基类型、6一BA浓度和培养温度 对珙桐初代培养影响极显著，低盐培养基WPM优于中盐培养基H和高盐培养基N6、MS；6一BA浓度以2．0mg／L时萌芽率最高；NAA 浓度对萌芽率影响不显著。初代培养的最佳组合为：在 l5 下选用WPM+2．0mg／L6一BA+0．1mg／LNAA。 关键词 ：珙桐 ；初代培养 ；影响因素 中图分类号：Q943．1 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2008l06—0083—02 珙桐 (DavidiainvolucrataBail1)又名 “中国鸽子树”，国家 度为 1500～2000Ix。如无特别说明则培养温度为25℃。 一 级保护植物，是第三纪古热带植物区系的孑遗种…，对于 1．4 统计分析 研究古植物区系和系统发育具有重要的科学价值 ，也是世界 定期观察外植体污染、褐化、死亡、萌发及芽的生长情况。 著名的观赏树种 ，具有极大的社会人文价值。然而由于其生 每隔1周对污染率、褐化率、萌芽率等指标作观察记载，数据 境范围狭窄、内果皮坚硬 、胚乳中含有生物抑制物、种胚形态 采用SPSS13．0进行统计分析。 后熟和生理后熟等原因，自然更新困难 ，种子败育现象严 2 结果与分析 重 。因此，开展珙桐组织培养和快速繁殖研究十分必要。 按照绵 阳师范学院和第29届奥林匹克运动会组织委员会签 2．1 最佳消毒方式的确定 订的中国鸽子树特别研究项 目协议 ，2008年3月66棵珙桐 试验结果 (表 1)表明，以处理 1即70％酒精30S+0．1％ 成功落户北京奥林匹克森林公园，但仍需大量的组培苗，而组 升汞3min浸泡消毒效果最佳，外植体污染率和死亡率均为 培成功的前提是建立高效稳定的无菌苗体系。本试验利用室 0，褐化率仅为9％，既能达到很好的消毒效果，又不会对材料 内培养 的带芽茎段为外植体，研究不同消毒方式、培养基类 造成较大损伤。随着升汞处理时间的延长，外植体褐化率和 型、激素配 比和培养温度对珙桐初代培养的影响，探索建立高 死亡率均呈现明显的上升趋势。添加了吐温80(处理5)，外 效稳定无菌苗培养技术体系，为工厂化生产提供指导。 植体褐化率和死亡率最高，分别达到了29％和2l％，可能是 吐温加重了消毒液对植物细胞的伤害，导致褐化与死亡。 1 材料与方法 表 1 不同消毒方式对珙桐带芽茎段萌发的影响 1．1 试验材料 2006年 l2月在四川绵阳千佛山苗圃购买珙桐 1～2年 生实生苗，首先在实验室进行培养，选取生长健壮、无病虫害 的幼嫩枝条为外植体。 1．2 试验 方法 1．2．1 消毒方式 以幼嫩带芽茎段为外植体，流水冲洗2h， 70％酒精浸泡30S，无菌水冲洗干净后，采用5种不同的方式 消毒 (表 1)，无菌水冲洗4—5次后，接种于WPM+1．0ms／L PVP培养基中。每种处理接种 10瓶，重复3次，28d后统计 无菌苗污染率、褐化率和死亡率。 2．2 4种影响因素对初代培养的影响 1．2．2 试验设计 采用L。(4)正交试验设计 (表2)，考察 2．2．1 不同因素对珙桐初代培养影响的统计分析 极差分 基本培养基、6一BA、NAA和温度4个因素