中药多糖苷结构中单糖种类的分析研究.pdfVIP

· 584·2011年6月第31卷第6期 JilinJournalofTraditionalChineseMedicine2011Vo1．31No．6 刍．球中隆药 中药多糖苷结构中单糖种类的分析研究 张晓丽 ，吴品昌 ，史 锐 ，李 楠 (1．辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110032；2．沈阳军区总医院，辽宁 沈阳110015) 摘要 目的：分析研究中药多糖中单糖的种类。方法：采用薄层酸水解，以三氟乙酸水解中药多糖，水解产物 中加入盐酸羟胺、吡啶和醋酐衍生化反应生成糖腈乙酸酯衍生物，采用气相色谱法测定中药多糖的单糖组成。结 果：检测出中药多糖中单糖的种类。结论：该方法简便、灵敏，可以准确测定出中药多糖苷 中所连单糖的种类。 关键词 多糖苷 ；薄层酸水解 ；糖腈 乙酸酯；气相色谱 中图分类号 R284．1 文献标志码A 文章编号 1003—5699(20l1)06—0584—03 为了确认中药多糖苷中所连单糖的种类，笔者在 色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。例如从图1 实践中选用薄层酸水解和多糖苷水解及衍生化产物 层析结果可进一步证实化合物 6为山奈酚的D一葡萄 的GC分析方法，确认 中药多糖苷结构中的单糖的种 糖，L．鼠李糖苷[。](如图1所示)。 类，简单，可行，可方便地用在 中药多糖苷的结构分 析。 1 仪器与试剂 气相色谱仪Angilent一6890，配备氢火焰离子化检 测器 (FID)；HP．1毛细管柱 (0．25otnix30m，0．25 m)；SGH500型全 自动氢气发生器 (北京)；GCK一3302 型全 自动空气源(北京)。 三氟乙酸( A)、盐酸羟胺、吡啶、醋酸酐均为分 析纯，肌醇为生化试剂，肌醇六乙酸酯(自制)。 多糖苷(自制)，纯度均在 95％以上；常用单糖 ： D．半乳糖对照品(批号 10026—200404)，D无水葡萄糖 对照品(批号 110833．200503)，D阿拉伯糖对照品(批 号 1506．200203)，D．木 糖 对 照 品 (批 号 111508． 图1 化合物 6的薄层酸水解色谱图 2oo4o4)，L-鼠李糖对照品 (批号 11683．200401)，均购 1：D．葡萄糖对照品；2：L广鼠李糖对照品；3：化合物 6；4：山奈 自中国药品生物制品检定所 ；L-岩藻糖对照品 (批号 酚对照品 21930)，购 自Servafeinbiochemicaheidelberg。 2 实验方法及结果 2．2 多糖苷的水解及衍生化产物的GC分析 2．1 薄层酸水解 精密称取各供试品，分别配制成 2．2．1 肌醇六 乙酸酯(内标)的制备及纯度检查 称 1mg／mL的甲醇溶液，照薄层色谱法 (中华人 民共和 取肌醇3g，加入盐酸羟胺4．5g、醋酸酐45mL和吡 国药典2010年版一部附录VIB)试验llj，吸取供试品 啶3mL，置具塞三角烧瓶中，在90℃水浴 中加热2h， 溶液 10～20 、相应的标准糖溶液和苷元溶液各 5 并不断搅拌。将反应液冷却至室温，置人冰水中，使 ～ 10 ，分别点于同一硅胶板 G薄层板上，置于层析 肌醇六乙酸酯析出。过滤，将沉淀(肌醇六乙酸酯)用 缸中2N盐酸蒸汽下水解 1h，取出，挥干 ，以[CHC1，： 蒸馏水20mL分多次洗涤过滤物，将其置于烘箱中 MeOH：H20(30：12：4)下层：冰醋酸9：1]溶液，上行展 100℃烘干备用l4j。 开，取出，晾干，喷以邻苯二甲酸一苯胺溶液，在 110 取制成的肌醇六乙酸酯加 甲醇制成 1mg／mL的 ℃加热至斑点显色清晰 j。供试品色谱中，在与标准 溶液，在本文设定的色谱条件下检测，其为单一色谱 考瑶中 药 2011年6月第31卷第6期 JilinJournalofTraditionalChineseMedicin