多重耐药鸡致病性沙门氏菌Ⅰ类整合子的检测研究.pdfVIP

维普资讯 中国畜牧兽医 2007年第 34卷第 1期 流行病防治 ·119 · 多重耐药鸡致病性沙门氏菌 I类整合子的检测研究 李成忠 ，王红宁 ，黄勇。，马孟根 ，吴琦 ，羊云飞。，谢涛。，柳萍。 (1．四川农业大学资环学院，雅安 625014；2．四川大学 “985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台，成都 610061； 3．四川农业大学动物科技学院，雅安 625014；4．四川农业大学生命理学院，雅安 625014) 摘要 ：采用药敏纸片法(NCCLS2004)，对 19株鸡致病性沙门氏菌进行 了药敏试验 ，结果 19株菌对丁胺卡那霉素、卡那霉 素、庆大霉素、新霉素、链霉素、氨苄青霉素、强力霉素、氟哌酸、头孢三嗪、氯霉素、磺胺异恶唑、四环素、先锋 V 13种药物 的耐 药率分别是：5．26 、63．16 、47．37 、36．84 、84．21 、84．2 、100 、57．9 、5．26 、52．6 、89．47 、100 、26．3 。 19株菌多为多重耐药 ：其 中耐 5种、6种、7种 、8种、9种、1O种药物 的分别为 1O．53％、5．26 、15．79 、21．05 、15．79 、 15．79 ，多重耐药率 84．21 (16／19)；根据 I类整合子的结构设计了3对引物，对 I类整合子的intI1、可变区、3’保守端进行 扩增 ，检测鸡致病性沙门氏菌 I类整合子 ，分析 I类整合子与多重耐药的关系，扩增出了750~2000bp的基因盒片段，检出率 为 73．68 (14／19)，多重耐药菌的I类整合子检出率为 87．5 (14／16)，I类整合子 PCR阳性菌株多重耐药率为 100 (14／ 14)。研究结果表明，I类整合子与多重耐药之间有明显的相关性 。 关键词：沙门氏菌；I类整合子；多重耐药；检测 中图分类号：$852．612 文献标识码 ：A 文章编号：1671—7236(2007)01—0119一O4 鸡沙门氏菌病是鸡场 的重要细菌性疾病 ，可引 化下，整合酶识别 attC位点，将游离的耐药基 因盒 起仔鸡 的大批死亡，产蛋鸡的产蛋量和孵化率下降， 整合到 自身染色体上 。被整合的基因盒在启动子的 鸡 的生长发育受阻，蛋受污染的机率增加 ，可经过垂 作用下，耐药基 因得 以表达使细菌具有耐药性。整 直感染 ，对养鸡业的危害极大。在养殖生产 中，除了 合子对细菌的耐药性，尤其是多重耐药性的研究有 应用疫苗进行免疫预防外 ，现在主要应用氨基糖苷 着非常重要的意义，研究结果表明整合子可以携带 类抗生素给予防治。由于抗生素在临床上的大量使 多种耐药基因盒 ，可 以使细菌同时对十几种抗生素 用 ，使得沙门氏菌的耐药性问题 日益突出，而且表现 产生抗性 (Khan等 ，2000)。 出多重耐药 ，对沙门氏菌耐药性进行检测 ，对防治沙 对I类整合子的检测研究，目前大多是对其耐 门氏菌感染十分必要。 药基因盒区进行扩增，由于不 同地区分离菌携带耐 对细菌多重耐药机制的探讨 ，具有捕获及表达 药基因的不一致和可变 区的片段 比较大，不利于整 外来基因能力的整合子 (integron)系统作为最新研 合子的检测和结果判定 ，且不利于整合子与耐药性 究的细菌耐药机制 ，正越来越 引起研究者 的关注 之间的关系研究。本试验根据 I类整合子 的结构设 (Mazel等，1999；Gebreyes等，2002)。根据整合酶 计 3对引物，对临床分离的鸡源致病性沙 门氏菌中I 编码基因intI序列的不同，目前发现有 6类整合酶。 类整合子的分布及携带 的耐药基因盒进行了检测研 在整合子介导细菌的耐药机制中，I类整合子起着 究，根据李可等的研究，对检测方法进行改进完善 ， 非常重要的作用。它的整合酶是含有 337个氨基酸 建立检测 I类整合子的PCR方法