DNA环介导恒温扩增试验检测结核分枝杆菌的研究.pdfVIP

中华医院感染学杂志 2011年第 21卷第 12期 ChinJNosocomiolVo1．21No．122011 · 论 著 · DNA环介导恒温扩增试验检测结核分枝杆菌的研究 金法祥，王华钧 ，孙小军 (绍兴市第六人 民医院检验科 ，浙江 绍兴 312000) 摘要 ：目的 探讨建立更快速 、准确的痰结核分枝杆菌检测方法 。方法 采用涂片抗酸染色法、罗 氏培养法和 DNA环介导恒温扩增 (LAMP)试验对结核分枝杆菌进行检测 ，并对其检 出率进行 比较 。结果 LAMP试验检 出 率最高，罗 氏培养法次之且检测时间长 ，抗酸染色法的检出率最低。结论 LAMP试验检测痰结核分枝杆菌具 有快速、敏感、简便、特异等优点，在肺结核患者的早期诊断中将发挥重要作用。 关键词 ：DNA环介导恒温扩增 ；结核分枝杆菌；核酸扩增技术 中图分类号：R378 文献标识码：A 文章编号：1005—4529(2011)12—2639—02 Applicationofloop—mediatedisothermalamplification in rapiddetection ofmycobacterium tuberculosis JINFa—xiang，WANGHua—jun，SUN Xia—jun ( PSixthPeople5HospitalofShaoxing，Shaoxing， ejiang312000，China) Abstract：OBJECTIVE TodevelopmethodofamorerapidandaccuratedetectionofMycobacterium tubarculosis． METHODSAcid-faststraininbysmear，Lowenstein—Jensencultureandloop—mediated isothermalamplification (LAMP)testfordetectionofMycobacterium tuberculosis。and comparedtheirdetection rate．RES[yLTSLAMP testthehighestdetectionrateofMycobacterium tuberculosis，followedbyTBcultureandalongtime，thelowest detectionrateofacidfaststainingmethodtOdetect．CONCLUSION TheLAMPtestisrapid，sensitive，simpleand specificmethodforthedetectionofMycobacterium tuberculosis．Intheearlydiagnosisoftuberculosiswillplayan importantrolein． Key words：Loop—mediated isothermalamplification；M ycobacterium tuberculosis；Nucleic acid amplification techniques 结核病是 中国重点控制的重大传染病之一，是 1．2 试剂与仪器 萋一尼染色试剂 (按文献Eli的方 当前我国面临的重要公共卫生问题 ，耐药结核病是 法 自行配制)，酸罗 氏培养基 由杭州加伟生物公司提 结核病控制工作难题之一，实验室检测在 国家结核 供 ，LAMP试剂 由广州华峰生物科技有 限公司提 病防治规划中发挥着不可缺少 的作用。DNA环介 供 。显微镜(日本奥林 巴斯)、低温高速离心机 (美 国 导恒温扩增 (LAMP)试验技术反应 1h即可完成核 ThermoFisherScientific公司)、生物安全柜 (美 国 酸扩增反应 ，通过荧光染色直接 目