水牛输卵管上皮细胞无血清培养的研究.pdfVIP

}72 2期 J r盔 gAg． Bi。。i 20D0e8c年．．12200月8 文章编号 ：1008—3464 (2008)04—0315—05 水牛输卵管上皮细胞无血清培养的研究 庄新杰，戢开丽，孙雷，段亚苹，陆阳清，张明，卢克焕 (广西大学 动物繁殖研究所 ，广西 南宁 530005) 摘要 ：以广西沼泽型水牛 (Bubalusbubalis)输卵管为材料 ，比较研究不 同取材方法、有无血清及生 长因子对水牛输卵管上皮细胞培养的影响。试验采用了三种不同的取材方法。原代用含血清的培养液来培 养，传代用添加生长因子的无血清复杂培养液和不添加生长因子的无血清基础培养液结合梯度减量无血清 培养法和直接无血清培养法来培养并进行观察 。结果表 明，水牛输卵管上皮细胞可 以在添加生长 因子的无 血清复杂培养液 中生长、并且最长可维持 56d优于基础无血清培养的 15d；刮取法获得 的细胞活率为 95 优于消化法的7O 和剪碎法的83 ；细胞冷冻复苏率为 83．6 ；第 5代的染色体数 目为 48条，这说明细 胞依然保持正常的生物学特性和二倍体核型。 关键词 ：水牛；输卵管上皮细胞 ；无血清培养 ；核型 中图分类号 ：$814．8 文献标识码 ：A Studyoncultureofswamp buffalooviductal epithelialcellsinserum—freemedium ZHUANG Xin-jie，JIKai—li，SUN Lei，DUAN YA—ping， LU Yang-qing，ZHANG Ming，LU Ke—huan (AnimalReproductionInstitute，GuangxiUniversity，Nanning530005，China) Abstract：Thisexperimentwasconductedwithswampbuffalo (Bubalusbubalis)tocomparethe effectsofdifferentacquisitionmethods，serum—freemedium orserum—containedmedium and serum— containedmedium with many growth factors，on thecultureofoviductalepithelialcells (OEC)． ThreemethodswereusedtoharvesttheOECs．TheprimaryOECswereculturedinserum medium and thesubcultureOECswere cultured in a gradualreducing serum-free medium system with many growth factors or direct serum—free medium system．Growth characteristics of OECs were subsequentlyevaluated．OECscouldgrow in serum—freemedium withmanygrowthfactorsandthey couldsurvival56dayslongerthan15daysindirectserum—freemedium．TheOECsviabilityofscraping methodwas95％ whichwassuperiortotheothertWOmethods (70％ and83 )inharvestingthe OEC．About82．3 cellswerefully recoveredfrom freezing．Theaveragechromatosomenumberof OECwas48stripsandtheOECofP5karyotypesofdiploidandbiologicalcharacteristicswerenorma1． Keywords：swam