M．L．FAME中ELISA试剂工作表的优化设计与应用.pdfVIP

· l262 · 浙江临床医学 2010年11月第 12卷第 11期 · 检 测 诊 断 · M．L．FAME中ELISA试剂工作表 的优化设计与应用 岳玉林 唐吟岫 谢国锦 王 奕 进入2l世纪实验室酶免 自动化得到了快速的 示英科新创 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HB— 发展，市场上有各种新型的全 自动酶免仪器，本院 cAb、抗 一HIV和北京万泰抗 一TP、抗 一HCV的进 于2010年4月引进 了M．L．FAME全 自动酶免分 板架。采用每次进4个酶标板的进板模式，并设置 析系统，为了优化其处理时间，通过调整进板顺 板问架的最早开始时Omin，编制工作表。 序、板架问时问隔和指定试剂位置、洗板单元和孵 表 1 8种 ELISA试剂实验步骤的编制和设计 育单元，保证实验结果的准确前提下提高其工作 效率，编制出了一个 8个微板的工作表 ，现报道 如下。 雠 ㈤ 馘㈤帅 ㈩ 馘㈤帅 ㈤城 一一 一一黼螽， 1 材料和方法 一一脯一一髓一一一贿一～黼一一一一～一．～一一地一～ 1．1 仪器与试剂 瑞士HAMILTON公司的M．L FAME全 自动酶联分析仪 (20个孵育槽，2个洗板 。 如∞ ，，加加一一一一一一一一一一∞∞∞∞㈨如∞伽伽一一一一 单元，3个试剂分配单元)和 FAME用户软件。 。 如 ，∞ 一 一一 一一∞ ∞ ∞ 伽 HBV5项诊断试剂盒和抗 一HIV诊断试剂盒 (厦门 一肭一吖 英科新创)，抗 一TP和抗 一HCV试剂盒 (北京万泰 一 ～～ ，加一 一一 一一∞ 如 ∞ 枷 公司)。HBV5项、抗 一TP及抗 一HCV(0．5ng／ml 一 ㈨ ∞一 一一 一一∞ 如 ㈨㈨∞ 伽一一 阳性质控)、抗 一HIV(2ng／ml阳性质控)以及不同 一一一 浓度的阴阳性血清标本。 一 如 Ⅺ∞∞ ～如 枷一瓶一 1．2 方法 抗 一HIV和抗 一HCV为ELISA试剂 一m 如一一一一一蚰∞～∞伽一一 两步法(洗板两次)，其余为一步法。在进板前加 一丽 好 HBV中HBeAb和 HBcAb的酶 。 2 工作表的优化设计 2．1 实验步骤的编制 根据试剂说明书，在 M． L．FAME用户软件 “方法”菜单的 “实验步骤”中， 编制8种 ELISA试剂的实验步骤，见表 1。 !生 ! !些生 蔓： !!蔓： 蔓： ! 2．2 指定试剂和分配洗板单元 在 FAME用户 洗板单元 2 1 2 2 1 l 2 1 软件 “工作”菜单下的 “指定编辑”项 中，将 8种 3 结果 ELISA试剂的洗液、酶、底物、终止液分别指定到各 洗板单元和分配单元，见表2和表3。 28种进板顺序和板间间隔中选出一种最短完 2．3 工作表的编制 用 bl???、b2777、b39．77、 成8个酶标板的时间组合模式，先顺序进 HBcAb、 1)4777、b5777、xc