单价四半胱氨酸重组噬菌体的构建及意义.pdfVIP

单价四半胱氨酸重组噬菌体的构建及意义.pdf

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中国科技论文在线 单价四半胱氨酸重组噬菌体的构建及意义# 1 2 1 1** 潘建波 ,黄婷婷 ,颜晓梅 ,吴丽娜 (1. 厦门大学化学化工学院化学生物学系 厦门 福建 361005 ; 5 2. 福建省南安市质量计量检测所 南安 福建 362300 ) 摘要 :本研究将双砷染料-四半胱氨酸(TC)体系引入噬菌粒载体 pCANTAB 5E,获得重组噬 菌粒pCANTAB 5E-TC,通过辅助噬菌体M13KO7的补救,得到了单价展示四半胱氨酸重组噬菌 体M13KO7-TC。结合流式细胞技术,以E.coli ER2738作为检测模型,探讨了单价重组噬菌 体M13KO7-TC在致病菌检测中的应用。实验结果表明,单价的四半胱氨酸重组噬菌体可以对 10 目标菌进行很好的区分,其检测灵敏度不亚于多价四半胱氨重组噬菌体,说明 TC-phage-FlAsH体系的普适性,其在致病菌检测方面具有广阔的应用前景。 关键词:化学生物学;双砷染料-四半胱氨酸体系;噬菌粒;单价重组噬菌体;致病菌检测 中图分类号:O652.6 15 The Construction of Monovalent Tetracysteine Recombinant Phages 1 2 1 1 Pan Jianbo , Huang Tingting , Yan Xiaomei , Wu Lina (1. Department of Chemical Biology, College of Chemistry and Chemical Engineering, Xiamen University, Xiamen, Fujian, 361005; 20 2. Nanan Supervision Testing Institute of Quality Metrology, Nanan, Fujian, 362300) Abstract: We construct a monovalent tetracysteine recombinant phage for simple and sensitive bacteria detection. Using monovalent phagemid pCANTAB 5E vector and helper phage M13K07, a monovalent TC recombinant phage M13K07-TC was engineered. Combined with flow cytometry, we demonstrate that the biarsenical-tetracysteine complex is a useful fluorescent tag for phage-based 25 bacteria detection. This work demonstrates the feasibility and benefits of using engineered TC-tagged bacteriophage to detect

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