单线粒体水平的抗癌药物作用机制研究.pdfVIP

单线粒体水平的抗癌药物作用机制研究.pdf

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中国科技论文在线 单线粒体水平的抗癌药物作用机制研究# 张翔,陈莎,张舒越,陈超翔,颜晓梅** (厦门大学化学化工学院化学生物学系,厦门 361005 ) 5 摘要:本文建立了一种通过测定线粒体的膜电位来研究抗癌药物作用机制的新方法。采用线 粒体膜电位探针罗丹明 123 对 HeLa 细胞的提纯线粒体进行染色,使用星形孢菌素、桦木 酸、紫杉醇、ABT-737 、姜黄素及碳酰氰基-对-氯苯腙等药物对线粒体进行刺激,利用实验 室自行研制的超高灵敏流式检测装置测定抗癌药物刺激前后线粒体膜电位的变化,从而判 断该药物是否通过线粒体通路诱导细胞凋亡。实验结果表明,桦木酸、ABT-737 、紫杉醇 10 可以直接作用于线粒体即直接启动内源通路诱导细胞凋亡,而星形孢菌素、姜黄素不能直 接作用于线粒体。实验结果与文献报道相符。单线粒体水平的膜电位检测能够简化样品的 复杂性,使得实验数据的解析更加简洁、明确,为抗癌药物的作用机制研究提供了一种灵 敏、简便、准确的实验方法。 关键词:分析化学;单线粒体分析;膜电位;流式检测仪;细胞凋亡;抗癌药物 15 中图分类号:O657 Study of Pharmacological Mechanism of Anticarcinogen at the Single-Mitochondrion Level by a Laboratory-Built High-Sensitivity Flow Cytometer 20 ZHANG Xiang, CHEN Sha, ZHANG Shuyue, CHEN Chaoxiang, YAN Xiaomei (Department of Chemical Biology, College of Chemistry and Chemical Engineering, Xiamen University, Xiamen 361005) Abstract: In this paper, a new method was established to study the pharmacological mechanism of anticarcinogens through the analysis of mitochondrial membrane potential (MMP). Rhodamine 123 25 was used to monitor the membrane potential of mitochondria isolated from HeLa cells, and a laboratory-built high-sensitivity flow cytometer was applied to measure the membrane potential of mitochondria before and after treatment with drugs such as staurosporin, betulinic acid, paclitaxel, ABT-737, curcumin and CCCP. The assays enabled us to quickly identify whether the anti-canc

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