广西巴马小型猪脂联素受体1和受体2cDNA的克隆及序列分析.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgriSci．2009，37(6)：2416—2418 责任编辑 张蕾 责任校对 昊晓燕 广西巴马小型猪脂联素受体 1和受体 2eDNA的克隆及序列分析 冯雪萍，兰干球，易顺华，易德桥，郭亚芬，李柏 (广西大学动物科学技术学院，广西南宁5300o5) 摘要 [目的]克隆并分析广西巴马小型猪脂联素受体 l(AdipoR1)和脂联素受体2(AdipoR2)编码基 因的cDNA全序列。[方法]利用 RT—PCR法，以骨骼肌总RNA为模板 ，分别扩增AdipoR1和AdipoR2全长 cDNA序列，纯化后连接 pMDl8一T载体，转化大肠杆菌DH50I． 筛选阳性克隆体，鉴定后测序 ，并与其他物种AdipoRl和AdipoR2cDNA序列进行同源性比较。 『结果]RT—PcR扩增得到大小与AdipoR1 和AdipoR2基因编码序列大小相同的片段 ，片段长度为 l128和 1161bp。同源性比较分析发现，广西巴马小型猪AdipoR1和AdipoR2 cDNA序列与GenBank中已报道的家猪脂联素受体同源性分别高达99．8％、99．7％，分别有1处和3处发生了碱基错义突变。[结论]该 试验成功克隆了广西巴马小型猪Ad~oR1和Ad~oR2基因的cDNA，为进一步研究Ad~oR基因的生物功能及设计以AdipoR为靶标的新 型药物奠定了基础 。 关键词 广西巴马小型猪 ；脂联素受体；克隆 中图分类号 $852．61 文献标识码 A 文章编号 o517—6611(2009)06—02416—03 CloningandSequenceAnalysisofAdiponecdnReceptor1na dReceptor2cDNA from GuangxiBamaMini-pig FENG Xue-pingetal (CollegeofAnimalScienceandTechnology，GuangxiUniversity，Nanning，Guangxi530005) Abstract [Objective]TocloneandanalyzethesequenceofAdiponectinreceptor1(AdipoR1)andreceptor2(AdipoR2)cDNAofGuangxi Bamamini—pig．[Method]TheAdiponectinreceptorscDNAswereamplifiedbyRT—PCRusingskeletalmusc]etotalRNAastemplateandthen ligatedintopMD18-Tvectorafterpurification．TherecombinantpMD18一T vectorwastransformed intotheE．coliDH5ctforidentificationand sequencing．AndtheresultswerecomparedwiththecDNAsequencefromotherspecies．[Result]Thefragments，1128and1161bpinsize， wereamplifiedbyRT—PCR andrespectivelyconsistentwiththecodingsequenceofAdipoR1geneandAdipoR2gene．Th ehomologyanalysis showedthatthesequencesofAdipoRlgeneandAdipoR2 genewererespectively99．8％ and99．7％ homologoustothesequenceofdomestic pigreportedinGenBankwith1and3basemissensemutationscorrespondingly．[Conclusion]TheAdipoR1geneandAdipoR2genewereSUC- cessfullyamplifiedfrom GuangxiBamamini—pig，layingthefoundationforthefurtherstudyofthebiologicalfunctionofAdipoR genesandthe designofnoveldrugswithAdipoR genesastarget． Keywords GuangxiBamamini—pig；Adiponectinreceptor；Cloning 近年的研究表明