光谱法在分子间非共价相互作用中的应用及进展.pdfVIP

第29卷，第1期 光谱学与光谱分析 200 and 9年1月 SpectroscopySpectralAnalysis January，2009 光谱法在分子间非共价相互作用中的应用及进展 李 锐1，代本才1，赵永德¨，卢 奎2 1．河南省科学院化学研究所，河南郑州450002 2．河南工业大学化学化工学院，河南郑州450001 摘要对光谱法在分子间非共价相互作用中的应用作了较详细的评述。重点介绍了紫外、荧光、圆二色、 红外、激光拉曼、共振散射等方法在分子问相互作用研究中的应用及进展，总结了这些方法的优缺点。紫 外一可见吸收光谱简便、快速，荧光光谱法可获得分子间作用的结合常数、结合位点数及作用方式等信息，圆 二色谱法是测定作用前后生物大分子构象变化的有效方法，红外光谱法可提供蛋白质二级结构及构象变化 的谱学信息，拉曼光谱法是研究溶液中生物大分子构象变化的有效技术，表面等离子共振(sPR)技术能在保 持生物分子天然活性的条件下实时检测分子间的相互作用。 关键词非共价相互作用；光谱法；评述 中图分类号：0657．3文献标识码：A 分析法、核磁共振分析法、质谱法、色谱法和电泳技术、微 引 言 量热法、扫描探针显微镜(原子力显微镜、扫描隧道显微镜 等)、平衡渗析以及超速离心技术等方法，从不同角度进行 生物大分子的功能往往是由其结构所决定的，生物大分 了广泛研究。本文主要综述了常用于小分子与生物大分子相 子结构与功能的研究是生命科学的核心课题。随着当代科学 互作用的光谱学方法的应用、优缺点及进展情况。 技术的发展，对生物大分子的研究已经从一般描述性的科学 过渡到探讨其具体化学结构的分子水平的科学。其中蛋白质 紫外一可见吸收光谱法 与核酸是生物大分子中的两大组成部分，它们直接涉及到生 命科学的许多核心内容，所以对活性小分子与蛋白质、核酸 紫外一可见吸收光谱是研究小分子与生物大分子相互作 等生物大分子非共价相互作用的研究一直是生物大分子研究 用的一种最方便、最常用的技术。小分子与核酸的相互作用 中最受关注的热点。小分子与生物大分子(核酸、蛋白质、多 会引起吸收带的红移(蓝移)现象或增色(减色)效应。吸光度 肽等)间非共价键的作用，包括静电作用、氢键、范德华力 减小、吸收带红移以及等吸收点的形成是小分子与DNA发 等，虽然其作用很弱(一般小于10kJ·moi～，比通常的共价生嵌插作用的光谱标志[1]。在蛋白质分子中某些氨基酸残基 键键能小1～2个数量级)，作用范围为0．3～o．5枷，但这(尤其是芳香氨基酸残基)和许多小分子中都会有生色团，在 些分子间弱相互作用力可在一定条件下起加合与协同作用， 紫外光谱中能产生吸收峰，根据峰形和峰位的变化即可判定 形成有一定方向性和选择性的强作用力，而这种强作用力是 小分子是否与蛋白质发生作用[2]。因此，可利用小分子与生 分子识别与组装的基础，对其本质的研究，有助于理解在生 物大分子结合前后，两者之一的吸收光谱的变化来判断小分 命科学、医学、药学领域中涉及到的分子之间的相互作用以 子与核酸、蛋白质等是否存在相互作用，得到作用方式[3“]、 及相互识别过程。因此，小分子与生物大分子间非共价相互 热力学参数等信息，还可以进一步研究实验条件对热力学参 作用的检测和表征成为人们普遍关注的课题。 数的影响。王春[53等用紫外光谱法对槲皮素与牛血清白蛋白 对于小分子与生物大分子间非共价相互作用的研究中， (BSA)的作用机理进行了研究，在此基础上进一步测定和计 人们采用了多种实验手段如光谱法(紫外、荧光、红外、圆二 算了不同温度下二者的结合参数