成像细胞分析仪和流式细胞分析仪的细胞周期分析结果的比较.pdfVIP

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GE Healthcare Life Sciences Application Note IN Cell Analyzer 2000 成像细胞分析仪和流式细胞分析仪的 细胞周期分析结果的比较 关键词:◎细胞周期分析 ◎成像细胞分析仪 ◎流式细胞分析仪 ◎IN Cell Analyzer 2000 前言 试剂 成像细胞分析仪IN Cell Analyzer 2000可以高速细胞成像, 细胞:HeLa 然后快速对图像自动定量分析获得数据结果。可以根据获 细胞周期染色试剂盒 (A公司流式细胞分析仪推荐商品) 得的图像计算出各个细胞内的荧光强度、进行群体分析。 紫杉醇 (SIGMA T-7194 ) 此外,可以获得一般流式细胞分析仪不能获得的形态信息 Nocodazole (SIGMA M1404 ) 或分子定位信息、还可以进行时间序列分析。 0.05 % T ry psin-EDTA (GIBCO 25300 ) 99.5 %乙醇 (关东化学14033-2B) 本报告比较了使用流式细胞分析仪与成像细胞分析仪进行 DMSO (SIGMA D2650 ) 细胞周期分析的结果,证明成像细胞分析仪具有优越性。 PBS (GIBCO 14 190 ) 使用的产品 设备 成像细胞分析仪IN Cell Analyzer 2000 图像分析软件IN Cell Investigator 流式细胞分析仪 (A公司) IN Cell Analyzer 2000 71-3357-11 方法 IN Cell Analyzer 2000检测样本的制备: 流式细胞分析仪 (A公司)检测样本的制备: 1. 按20,000细胞/ 孔的比例,在96孔板内接种He La细胞, 1. 按100,000细胞/孔的比例,在24孔板内接种HeLa细胞, 过夜培养 过夜培养 2. 更换无血清培养基培养24小时 2. 更换无血清培养基培养24小时 3. 用血清培养基调整药物的浓度后,加药,继续培养24 3. 用血清培养基调整药物的浓度后,加药,继续培养24 小时。药物浓度如下所述 小时。药物浓度如下所述 Nocodazole 1 μM 0.1 μM Nocodazole 1 μM 0.1 μM 紫杉醇 1 μM 0.1 μM 紫杉醇 1 μM 0.1 μM 溶剂对照 1 %DMSO 溶剂对照 1 %DMSO 4. 用PBS清洗2次 4. T ry ps i n- E DTA 消化细胞,培养基重悬细胞,收集到 5. 添加冰冻的70%乙醇200 μl/孔,4℃放置60分钟 Eppendorf管中 6. 用PBS清洗2次 5. 离心 (1,000 ×g 、5 min 、室温),去除上清液后, 7. 细胞周期用染色试剂盒 (A公司流式细胞分析仪推荐商 PBS清洗2次 品)每孔添加200 μl 、避光,室温30分钟 6. 离

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