AGPase反义基因转化番茄研究.pdfVIP

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维普资讯 第23卷 第2期 云南农业大学学报 V0I.23 No.2 2008年 3月 JournalofYunnanAgricultural University Mar.20o8 AGPase反义基因转化番茄研究 杨正安 ,‘张应华 ,‘丁玉梅 ,许 彬 ,‘张兴国。 (1.云南农业大学园林园艺学院,云南 昆明650201;2.云南省农业生物技术重点实验室,云南 昆明650203; 3.西南大学园艺园林学院,重庆 400716) 摘要:将含有魔芋AGPase反义基因的质粒 pBAGP通过冻融法转化到根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens) 菌株LBA4404中,再采用叶盘法将其转化进番茄 (LycopersiconesculentumMil1.)栽培品种 “合作908”中, 获得含AGPase基因的番茄抗性植株。最后 ,经卡那抗性鉴定、M叩 Ⅱ基因和 AGPase基因PCR扩增和PCR— Southern杂交检测表明,反义 AGPase基因成功整合到番茄基因组 ,为番茄改良品质育种奠定了材料基础。 关键词:腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶;反义载体;遗传转化;番茄 中图分类号:S641.2.032 文献标识码:A 文章编号:1004—390X (2008)02—0158—04 StudyonGeneticTransformationofTomato UsingAGPaseAnti—SenseGene YANG Zheng—an ,ZHANG Ying—hua ,DING Yu—mei,XU Bin ,ZHANG Xing—guo (1.Facul~ofHorticultureandLandscape,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China; 2.BiotechnologyResearchInstitute,YunnanAcademyofAgriculturalSciences,Kunming650223,China; 3.CollegeofHorticultureandLandscape,SouthwestUniversity,Chongqing400716,China) Abstract:CarryinganAmorphophallusadenosinediphosphateglucosepyrophosphorylase(AGPase) anti—sensegeneunderthedriveofCaMV35Spromoter,theplasmidpBAGPwasrtansferredintotomato (LycopersiconesculentumMil1)cuhivar “Hezuo908”viaagrobacterium—mediatedtransformation.The resultsofanti—kanamycintest.PCRamplificationsofAGPasegeneandNPTIIgeneandPCR—southeiTl blottingprovedthatAGPasenati—sensegenewassuccessfullyintegratedintogenomeoftomato,which providedamaterial basisforimprovingtomatobreed. Keywords:Adenosinediphosphateglucosepyrophosphorylase(AGPase);nati—sensevector;genetic transfomr ation;Lycopersiconesculentum 近年来,番茄育种在抗病、抗逆和品质改 良等

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