戊唑醇对赤霉病菌生长发育影响的细胞学和免疫细胞化学研究.pdfVIP

维普资讯 菌 物 学 报 23(4)：580-589，2004 Mycosystema 戊唑醇对赤霉病菌生长发育影响的细胞学 和免疫细胞化学研究 韩青梅2 康振生 2 黄丽丽 蒋选利2 (西北农林科技大学植物保护学院； 西北农林科技大学生物技术中心 陕西杨凌 712100) 摘要：本文采用电子显微镜和免疫细胞化学技术研究了三唑类杀菌剂戊唑醇 (Tebuconazole)对小 麦赤霉病菌Fusariumgraminearum菌丝的形态结构、细胞壁成份和毒素产生的影响。结果表明， 戊唑醇不但强烈抑SUT培养基上菌丝的生长，而且可引起菌丝形态和结构的明显畸形。电镜观察 发现，药剂处理后菌丝呈现不规则的肿胀、过度分枝；菌丝细胞壁不规则加厚，尤其是菌丝顶端 部位加厚明显；菌丝形成的不完整隔膜增多，且隔膜壁不规则增厚：菌丝细胞内液泡增加、脂肪 粒累积，细胞器排列紊乱，原生质最终坏死。有时在坏死菌丝内可发现新的子菌丝，但子菌丝细 胞壁不规则加厚、细胞质坏死、也呈不正常状态，并可再度形成新的菌丝。免疫细胞化学标记表 明，药剂处理后菌丝细胞中毒素的标记密度明显低于对照菌丝，表明毒素的产生受到了抑制；而 菌丝细胞壁的主要成份几丁质和D一1，3一葡聚糖的标记密度明显高于对照处理，表明药剂处理可引起 菌丝细胞壁中几丁质和p一1，3一葡聚糖的过度累积。 关键词：超微结构，免疫标记，脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON)，几丁质，p一1，3一葡聚糖 中图分类号：Q939．96 文献标识码：A 文章编号：1672-6472(2004)04—0580-0589 小麦赤霉病是由禾谷镰刀菌FusariumgraminearumSchwein．引起的、在世界各麦区广泛分布 的病害，不仅造成严重的产量和经济损失，而且由于其能够产生毒素污染小麦籽粒，使小麦口口质 下降，人畜食用后引起头晕、呕吐等中毒症状，对人类健康构成严重威胁。因此，有效控制赤霉 病的发生危害具有重要的实际意义。近几年的田间试验结果表明，三唑类杀菌剂戊唑醇不仅能够 降低小麦赤霉病的危害，减少产量的损失，同时能够降低病籽粒中毒素的含量 (Siranidou＆ Buchenauer，2001：Matthies＆Buchenauer，2000)。尽管不同的三唑类杀菌剂具有相似的作用机 制，即抑制麦角甾醇的生物合成，但在抵抗不同的病原菌方面也表现出明显不同的抗菌活性 (Buchenauer，1987)和机制，如对锈菌、白粉菌、黑粉菌生长发育影响的细胞学研究结果均已证 明这点 (Hippe，1984；Pring，1984；SmolkaWolf,1986；康振生等，1993；1996)，但目前就 该类杀菌剂对赤霉病菌的超微结构和免疫细胞化学研究还未见报道。因此，本研究采用电镜技术 和免疫细胞化学技术，研究了戊唑醇在活体外对禾谷镰刀菌形态结构、细胞壁的成份和毒素形成 的影响，以便从细胞学方面揭示该杀菌剂的作用机制，为生产实践中合理利用戊唑醇防治小麦赤 霉病提供理论依据。 国家杰出青年基金项目~教育部科学技术研究重点项目f03158)~高校博士点基金项目(2000071207)；国家 “十五” 攻关项目资助 通‘讯作者 e-maihkangzs(~,nwsuaf．edu．cn 收原稿日期：2004-03-27，收修改稿 日期：2004—06—16 维普资讯 4期 韩青梅等：戊唑醇对赤霉病菌生长发育影响的细胞学和角疫 堕 堂 窒 ! 1材料与方法 1．1病原菌及其培养 小麦赤霉病菌Fusariumgraminearum强致病菌株由西北农林科技大学植病研究所提供。将病 菌接种在装有PDA培养基的直径为9cm培养皿中，25℃下培养，待菌落长到直径5～7cm时， 用直径5nli1／的打孔器取菌饼接种于PDA培养基上，25℃培养2d后，用于杀菌剂处理。 1．2杀菌剂处理和取样 25％的戊唑醇乳油 f德国拜耳公司产品)，在无菌条件下用无菌水稀释到0．5ml／L备用。将灭 菌滤纸条 (0．7cm~5cm)在药液中浸透后