抑癌基因VHL治疗实体肿瘤的实验研究.pdfVIP

维普资讯 肠外科杂志2005年5月第8卷第3 ch 』墅 堕型 24l · 论 著 · 抑癌基因VHL治疗实体肿瘤的实验研究 孙学英 王建立 唐波 刘凤军 乔海泉 姜洪池 摘【要】 目的 探讨抑癌基因VHL治疗EL一4实体肿瘤的效果。方法 皮下注射EL一4淋巴瘤 细胞建立 C57BL／6小鼠实体肿瘤模型。当肿瘤生长至直径分别为0．1cm和0．4cm时，将小鼠随机 分为治疗组和对照组，每组各6只。治疗组瘤体内采用脂质体法注射 pcDNA3一VHL基因，对照组注射 空载体，观察肿瘤生长情况。用免疫组织化学(免疫组化)和(或)Western印迹方法检测VHL基因、血 管内皮生长因子 (VEGF)、缺氧诱导因子一1ot(HIF一1ot)、抗凋亡因子 (bcl一2)在瘤组织内的表达 ，测定肿 瘤的微血管密度 (MVD)；TUNEL法测定肿瘤的凋亡指数 (AI)。结果 VHL基因治疗能够根除小的肿 瘤(直径0．1cm)，但只能减慢而不能消除较大肿瘤 (直径0．4cm)的生长。治疗组VHL基因在瘤组织 内高表达，VEGF、HIF一1ot和Bcl一2的表达显著低于对照组 ，MVD明显低于对照组 (P0．05)，AI显著 高于对照组 (P0．01)。结论 VHL基因疗法对小鼠EL一4实体肿瘤的生长有显著的抑制作用。 【关键词】 抑癌基因，VHL；血管生成；基因治疗；缺氧诱导因子 Gene transfer ofvon Hippel-Lindau inhibits thegrowth of transplanted solid tumors SUN Xue—ying．WangJian—li，TANGBo，LIUFeng-jun，QIAOHai—quan．JIANGHong—chi．CenterofHepatospleni~ Sarger) HeilongfiangProvince，TheFirstAffiliatedHospital，HarbinMedicalUniversity．Harbin150001． China Correspondingauthor：SUN Xue-ying，E-mail：kevsvn88@ hotmail．conl A【bstract】 Objective ToexploretheeffectofvonHippel一1indau(VHL)geneo“growthofEL一4 solidlUnlorsinvivo．Methods C57BL／6micemodelofsolid tumorswasestablishedbysubcutaneous injectionofEL-4lymphomacells．Micewererandomlydividedintotwogroupsastreatmentgroup(， 6) andcontrolgroup(12=6)whentumordiameterincreasedto0．1am and0．4am respectively．Plasnfid pcDNA3-VHLwasinjectedintosolidtumorintreatmentgroup，emptypcDNA3vectorincontrolgroup．The growthoftumorwasobserved． ImmunohistochemistryandWesternblotanalysiswereusedtoexaminethe transgenicexpressionofVHL．hypoxiainduciblefactor一10【(HIF)一1ot，bcl-2andVEGF．Microvessaldensit) (MVD)andapoptosisindex(AI)oftumorswerealsodetected．Results VHLgenetransfereradicated tumorswithsmallsize(0．1cmdiameter)，butitonlyretardedthegrow