多重引物等位特异PCR法快速检测Apo E基因型的研究.pdfVIP

维普资讯 昆 明 医 学 院 学 报 2008。(1)：69 72 CN 53—10 l／R JournalofKunmingM edicalUniversity 多重引物等位特异PCR法快速检测ApoE基因型的研究 李冬梅 ”，王玉明力，刘 华 ，詹淑芬 2】，韩 林 (1)章丘市人民医院检验科，山东章丘 250200；2)昆明医学院第一附属医院检验科，云 南 昆明 650032) [摘要]目的 建立多重引物等位特异PCR方法结合内参照基因对 ApoE基因型进行分析，并与PCR— RFLP法和直接测序结果进行比较．方法 以基因组 DNA为模板 ，用多重引物等位特异PCR法、PCR—RFLP 检测了 158例体检者的APOE基因型，典型基因型用直接测序法检测并通过GeneBank对 比．结果 共检测出 5种常见的基因型：e22／ (0％)，e3／3 (77．2％)，e4／4 (0．6％)，e32／ (13．3％)，e4／3 (7．0％)，e42／ (1．9％)。两 种方法结果一致，测序结果与GeneBank对比一致．结论 多重ASP—PER检测ApoE基因型具有快速简便 、 准确可靠和经济、适用的特点，有一定的推广价值． [关键词]ApoE基因型；多重引物特异PCR；PCR—RFLP [中图分类号]Q343．1[文献标识码]A [文章编号]1003—4706 (2008)01—0069—04 RapidDeterm inationofApolipoproteinE Genotypesby Multi-ASP．．．PCR U Dong—mei”，W ANGYu—ming2】，LIU Hua2】，ZHAN Shu—fen2)，HAN Lin2) (1)Dept．ofClinicalLaboratory，ZhangqiuPeople Hospital。ShandongZhangqiou250200；2)Dept．of ClincialLbaoratory，The1stAffiliatedHospitalofKunmingMedcialUniversity，KunmingYunnan650032， China) lAbstract]Objective Toestablishamethodofmultiallele—specificprimersPCR (Multi—ASP—PCR) withinternalcontrolgenetoanalyzeAPOE genotypes，na dtocomparetheresultswiht htosebyPCR-RFLPna d htose by directnucleotide sequencing． Method APOE genotypes of 158 sampleswere naalyzed by Multi—ASP—PCR na dPCR—RFI ．Typical genotpy eswereidentifiedbydirectnucleotidesequencingna dhte resultswerecompraedwithhtoseof GeneBank．Results 5commongenotypesofAPOEhadbeenidentfiied， e3／3 (77．2％)。e4／4 (0．6％)，e3／2 (13．3％)，e4／3 (7．0％)，e4／2 (1．9％)，nadforallsmaples，theresults ofMuhi-ASP-PCR were in 100％ concordna cewith thoseofPCR—RFLP．Theresultsofsequencingwere in agreementwiththoseofGeneBnak．Conclusion Multi—ASP—PCR iSasimple，ra