复方金思维对老年性痴呆模型大鼠海马神经元微管和Tau蛋白磷酸化相关酶类表达的影响.pdfVIP

维普资讯 2008年2月第25卷第 l期 天 津 中 医 药 Feb．2008，Vo1．25 No．1 TianjinJournalofTraditionalChineseMedicine 59 复方金思维对老年性痴呆模型大鼠海马神经元 微管和Tau蛋 白磷酸化相关酶类表达的影响术 陈玉静 ，王 蓉 ，盛树力 ，姬志娟 ，赵志炜 ，尹军祥 ，时 晶 ，田金洲 (1．北京中医药大学东直门医院老年病科，北京 100700；2．教育部神经变性病学重点实验室，北京 100054) 摘要 ：【目的】观察 中药复方金思维对老年性痴呆(AD)模型大鼠海马 CA1区神经元微管结构和 Tau蛋 白磷酸化 相关酶类表达 的影响。方【法】48只SD大 鼠随机等分为假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组和金思维大、中、小剂量组 。 采用双侧脑室注射微量链脲佐菌素 (STZ3mg／kg)建立拟 AD大鼠模 型 ，模 型成功后 ，治疗组分别予盐酸多奈哌齐和 金思维(分为3个不 同剂量)进行 3个月的治疗 ，模型组和假手术组给予等体积的双蒸水 。行灌注 同定，冰冻切片，取 各组大鼠海马 CA1区组织进行光镜和电镜观察，并进行糖原合成激酶 3p(GSK-3[3)、蛋白磷酸酶-1(PP—1)、蛋 白磷酸 酶一2A(PP一2A)的免疫组化染色。 结【果】1)AD火 鼠海马神经冗微管结构出现明显的断裂或溶解现象，而用金思维治 疗后这种现象得到明显改善。2)AD大 鼠海码内的蛋 白激酶 GSK一3[3明显增多、PP～l、PP一2A明显减少 ，金思维各剂量组 上述酶类表达均接近至止常水平 ，与盐酸多奈哌齐组 比较无差异。 结【论】AD大鼠模型脑组织微管结构和Tau蛋 自磷酸 化相关酶类的表达发生异常 ，金思维可修复断裂或溶解的微管 ，使蛋白激酶和磷酸酶的表达接近至正常水平。 关键词 ：阿尔茨海默病 ；Fau蛋 白；微管 ；金思维 中图分类号 ：R285．5 文献标识码 ：A 文章编号：l672一l519(2o08)01—0059—04 老年性痴呆 (AD)足一种慢性 、进行性神经变性 步明确该药对 AD的作用靶点和作用机制 。 疾病 ，临床病理研究发现 AD患者的痴呆症状严重 1 材料与方法 程度与脑组织中神经元纤维缠结(NFT)数量呈正相 1．1 实验动物及模型制备 SPF级健康雄性Spr~gue— 关l1-2]。NFT主要 由成对螺旋纤维 (PHF)构成 ，其主要 Dawley(SD)大鼠48只，体质量 250～300g，购 自北京 成分是过度或异常磷酸化的Tau蛋 白口J。 维通利华实验动物 中心(合格证号 ：SCXK京 2006— 本实验采用侧脑室内注射链脲佐菌素 (ic—STZ) 0008)。实验过程中动物 自由摄食和饮水 (于术前禁 制作拟AD大鼠模型4{1。STZ是一种 甲基亚硝基脲产 食除外)，室温 22～26℃，湿度 28％～30％。48只大 鼠 物，对实验动物的胰岛B细胞具有高度选择性 的毒 随机分成假手术组 、STZ侧脑室注射组 (模型组)、 性作用口I，腹腔注射可导致 1型糖尿病 ，侧脑室注射 STZ侧脑室注射加金思维大 、中、小剂量组 (高剂量 STZ后大 鼠出现空间学习记忆功能异常 ，伴海马胆 组 、中剂量组 、低剂量组)、STZ侧脑室注射加盐酸多 碱乙酰转移酶 (ChAT)活性降低问。研究发现 STZ在 奈哌齐组 (对照组)，每组 8只。参考Sharma等的方 脑内干扰胰岛素和胰岛素样牛长 子 (IGF)信号转 法 ，所有大鼠经 10％水合氯醛 (3mL／kg)麻醉后， 导，阻断胰岛素受体 自身磷酸化和内在的酪氨酸激 固定于江湾 I型 C大 鼠立体定位仪上 ，常规消毒皮 酶活性 ，但未引起外周血糖升高，胰腺结构和胰岛 肤 ，正中矢状切 口，分离骨膜 ，锥颅器钻开颅骨，暴 素的免疫活性也未受影响；实验 中还发现 ic—STZ模 露硬脑膜。除假手术组外，其余组动物均用微量注 型出现脑体积缩小 ，细胞丢失、p样淀粉酶 (Ap)沉 射器每侧侧脑室各注射