甲基莲心碱、红霉素逆转K562／A02细胞多药耐药及其机制的研究.pdfVIP

血液学杂志2005年5旦笠 鲞笙 塑 i!』旦! ! ： · 短 篇 论 著 · 甲基莲心碱 、红霉素逆转 K562／A02细胞 多药耐药及其机制的研究 林秀梅 谢兆霞 秦群 多药耐药 (muhidrugresistance，MDR)足当今肿瘤治疗 Illl，VRP5 g／ml，分别加入 K562／A02细胞，每组 3孑L， 的一大难点，巾药复方拈新康有逆转耐药 ，增加化疗效果的 设无药对照组3孑L。置37oC、5％CO!、饱和湿度条件下培养 作用 ，其有效成分甲基莲心碱 (Nef)可增加肿瘤细胞内抗 48h，加 M盯 10xIlJ~L，继续培养4h，弃 I清 ，JJ】【二甲基 、匝6风 癌药物浓度逆转 MDR 大环内酯类抗生素红霉素(EM) (DMSO)l00xIlJ~L，终止反应，用 EXL800UV个=『{动酶标仪 体外有逆转 MDR的作用 为探讨 Nef、EM逆转 白I皿痫细 (美闫Bio—Tekinstruments公司产品)检测波长570nnl吸 胞 MDR的机制 ，我们以多药耐药细胞株K562／A02为研究对 度 (．4)值，计算细胞存活率。 象 ，分别采用 MITr法 ，免疫组化 SABC法 ，RT—PCR法研 究 细胞仔活半(％)=4寅骑 l值／_4f《肌l值 X100％ Nef、EM对 K562／A02细胞增殖及 Pgp／nldrl 因表达 的影 根据对数剂量一概率单位回归法求各组llI1J]『系数及 ，c 值 响 ! 耐药倍数 IC50(敏感细胞) 材料和方法 IC50(逆转前) 逆转倍数 IC50(逆转后) 1 细胞系和细胞培养 K562细胞…巾南大学湘雅医学院 4 SABC法测定 Pgp表达 取对数乍长 的 K562／A02细 细胞 中心提供；K562／A02细胞购 自巾同医学科学院 液学 胞洲整细胞密度为 lXl0／ml和5Xl0／nil，分U接种 j培 研究所一K562细胞 、K562／A02细胞分别接种于含 10％小牛 养瓶 ，药物按终浓度分4组 ：Nef10 g／lnl，EM loo g／nil，Nef 血清的RPMI1640培养液 ，37℃、5％CO 、饱和湿度培养箱 l0 g／n1l+EM lOHD {!／ml，VRP5xIg／ml， ，置 37 、5ok 巾培养 ，3～4d换液 1次 K562／A02细胞培养体系巾加入 CO，、饱和湿度条件下培养．．前者培养 2d， 培养5tl，另 终浓度为0．6～0．8 g／ml的盐酸阿霉素(ADM)以维持耐药 取 K562细胞和K562／A02细胞不加药物作为对照组 以I： 性 ，实验前无药培养2周 l0组细胞收集后分别计数 ，各取 3X10。个细胞加入 rrRlzol 2 药物和试剂 ADM 为Pharmacia＆U