pHPcZn与肌红蛋白结合性能的研究.pdfVIP

第28卷，第9期 光谱学与光谱分析 200 and 8年9月 SpectroscopySpectralAnalysis September．2008 P—HPcZn与肌红蛋白结合性能的研究 魏少华，卢 珊，季 春，林 云，周家宏，沈 健’ 南京师范大学化学与环境科学学院，江苏省生物功能材料重点实验窄，江苏南京210097 摘要利用荧光光谱和同步荧光光谱技术研究了在模拟人体生理条件下p四(羧基苯氧基)锌酞菁 (p-HPcZn)与肌红蛋白的相互作用。p-HPcZn能够显著地猝灭肌红蛋白的荧光，说明两者之间存在着很强 的相互作用。变温荧光光谱实验的结果确证该作用可以导致p-HPcZn分子和肌红蛋白分子之间形成复合 物，使得p-HPcZn可以通过静态猝灭有效地猝灭了肌红蛋白的荧光。通过对荧光光谱的数据进行处理得知， 和肌红蛋白之间发生的相互作用还使肌红蛋白分子的构象发生改变。 关键词酞菁；肌红蛋白；相互作用；荧光光谱 中图分类号：0657文献标识码：A DOI：10．3964／j．issn．1000—0593(2008)09—2148—04 灭肌红蛋白荧光的机理，求出两者的结合常数和结合位点， 引 言 以及肌红蛋白构象的变化程度，为探讨P—HPcZn在体内的 储存、传输等提供了研究信息。 对于能应用于光动力疗法领域的酞菁类光敏剂而言，在 临床应用时均是通过静脉注射的方式进入人体，首先与体内 的各种蛋白质(如血清蛋白、脂蛋白等)结合，然后被运载到 人体的肿瘤组织部位口]。因此，研究新型酞菁类化合物与人 体内各种蛋白质之间的相互作用对探讨其在体内的传输机理 有着重要意义。另外，有关酞菁类化合物与蛋白质相互作用 的研究还使酞菁类化合物的应用领域得到进一步拓展，如蛋 白质染色剂，制备荧光抗体，微量蛋白的快速简便分析，以 及增强作为抗癌光敏剂的靶向受体功能等口]。通过分析新型 酞菁类化合物与各种蛋白质之间的相互作用，探讨其应用潜 力的基础研究已引起研究工作者的广泛关注和重视，并且日 趋活跃‘3’5]。 Structureof Fig．I p-HPcZn 我们课题组最近合成出一个新的水溶性酞菁类衍生物一 p四(羧基苯氧基)锌酞菁(p-HPcZn)(图1)[6j，光动力性质 1实验部分 的研究结果表明该合物具有良好的光敏性能。肌红蛋白是由 153个氨基酸残基组成的多肽链和一个血红素(铁卟啉)组 1．1仪器与试剂 成，在人体肌肉组织内主要起储存氧和促进氧在细胞中扩散 Varian公司的CaryElipse荧光光谱仪。 的作用，研究两者的相互作用不但可以分析两者的作用机 理，而且可以探讨该作用对肌红蛋白功能的影响。本文利用 tool·L1的溶液，使用前用微量进样器准确移取一定体积的 荧光光谱和同步荧光光谱技术研究了在模拟人体生理条件 1×10_3 7．4的 tool·L-1的p-HPcZn原液，利用pH 下，p-HPcZn与肌红蛋白的相互作用，分析了p-HPcZn猝 KH。P(1一NaOH缓冲溶液将其稀释至所需浓度；马心肌红蛋 收稿日期：2007-01—26．修订日期：