染料木素铬Ⅲ配合物与DNA相互作用的研究.pdfVIP

第28卷，第7期 光谱学与光谱分析 2oo alld 8年7月 Spectroscopy July，2008 S蕾)ectralAmalysis 染料木素铬(Ⅲ)配合物与DNA相互作用的研究 余燕影1，李 华1，胡 昕1，曹树稳2’ 1．南昌大学化学系，江西南昌330031 2．南昌大学食品科学教育部重点实验室，江西南昌 330047 7．2 摘要在pH Tris缓冲溶液中，采用紫外、DNA熔点、荧光、粘度等手段研究了染料木素铬(Ⅲ)配合 物与小牛胸腺DNA(ctDNA)的作用机制，探讨了其作用模式。当加入一定量的ctDNA时，染料木素铬(Ⅲ) 配合物的紫外吸收光谱的最大吸收峰产生明显的减色效应；而配合物体系的荧光强度、共振光散射信号随 ctDNA的加入逐渐增强。配合物的存在能有效猝灭EBDNA体系的荧光，且猝灭方式为静态猝灭。同时 ctDNA的熔点和ctDNA溶液的粘度随配合物的加入而增大。据此推断，染料木素铬(Ⅲ)配合物与ctDNA 之间具有较强的作用，配合物主要以插入方式与DNA结合，二者的键合常数为1．9×105L·rnol～。该研究 结果提示染料木素铬(Ⅲ)配合物有望作为抗癌活性候选药物，值得进一步深入研究。 关键词染料木素；铬配合物；小牛胸腺DNA；插人 文献标识码：A 中图分类号：0614．6l；Q523 文章编号：1000-059312008)07—1587．05 引 言 1实验部分 核酸是生物体的重要组成物质，是遗传信息的携带者和 1．1仪器与试剂 基因表达的物质基础，在生物的生长、发育和繁殖等活动 中，具有十分重要的作用。核酸的结构直接影响其功能，并 与致癌、抗癌有关。金属配合物可作为DNA结构和构象的 (上海虹益仪器仪表有限公司)，乌贝路德粘度计(上海化学 探针，探讨金属配合物与DNA作用的反应机理，进而研究 试剂公司)。 金属配合物的分子结构和与DNA反应机理的关系，为筛选 三羟甲基胺基甲烷Tris(进口分装，上海蓝季发展科技 和设计合成出具有应用前景的低毒、高效、抗菌、抗肿瘤药 有限公司)；溴化乙锭EB(北京夏新生物技术有限公司)；小 nlrnol 物提供一定的科学研究基础及理论根据。因此金属配合物与 牛胸腺DNA(ctDNA，华美生物工程公司)，将其用50 ·L_1 DNA的键合作用一直是人们十分关注的、比较活跃的研究 NaCl溶解，于4℃保存备用，纯度用Uv谱检测 领域‘1．2]。 6600 染料木素(GemsteiIl，又名染料木黄酮、金雀异黄素)是 一种广泛存在于天然植物中的活性成分，具有弱雌激素样活 献[31方法合成，配合物用DMS0配制成一定浓度的贮备液， mnl01．L_1Tris-HCl+50帆。卜L-1NaCI 性，表现出良好的抗癌、预防中老年骨质疏松症、女性更年 测试液用5 pH 期综合症和心血管疾病等作用[3]。目前有关染料木素配合物 7．2的缓冲溶液稀释至所需浓度。其他试剂均为市售分析纯， 的研究报道仅见染料木素稀土配合物的合成及其清除自由基 实验用水为二次蒸馏水。 活性研究【4]，而染料木素铬配合物与DNA的相互作用尚未1．2实验方法 见报道。本文采用紫外光谱法、荧