金黄地鼠动脉粥样硬化模型的建立.pdfVIP

实 验 动 物 金黄地鼠动脉粥样硬化 模型的建立 李宝龙 ，夏长友 ，李松滨 ，赵 良友 ，于 敏 (1．黑龙江中医药大学药物安全性评价中心，哈尔滨 150040； 2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨 150001) 摘要：目的 利用复合因素建立金黄地鼠动脉粥样硬化模型，观察造模后各段主动脉的病理学变化，为这一疾病的基础 研究提供实验对象和材料。方法 随机将 3()只金黄地鼠分为对照组(15只)和模型组 (15只)，对照组给予普通饲料，模 型组用高脂饲料喂饲加以注射牛血清白蛋白，饲养8周。主动脉切片进行病理形态学观察。结果 模型组主动脉各部位 出现粥样斑块，主动脉 弓、胸主动脉、腹主动脉、髂动脉 内膜增厚，出现大量的斑快和炎细胞浸润。结论 本方法可在短 时间内造成金黄地 鼠出现动脉粥样硬化病变，可作为研究动脉粥样硬化疾病的实验材料。 关键词：动脉粥样硬化；金黄地鼠；牛血清白蛋白 DO1：10．3969／J。ISSN．1671-6027．2010．12．020 动脉粥样硬化(atheroselerosis，As)是造成心脑血管疾病 1．4 病理标本制备 的主要原因，严重危害人类健康，但其发病原因和机制均未 8周后取材。用 l％戊巴比妥钠(45mgk／g)麻醉后将动物固 完全明确，选择合适的实验动物建立As动物模型是预防和 定于解剖台，由主动脉弓基部至髂总动脉分支处完整取材。 治疗AS研究的基础。因此迫切需要一种易于推广、省时省 苏丹Ⅳ染色：用眼科剪沿动脉纵向剪开，生理盐水轻轻 力、更接近人体 AS的发病机制的动物模型。本研究以金黄地 冲洗血管，4％中性福尔马林固定24h，水冲洗 lOmin。擦干组 鼠为体外研究对象，在高脂饮食饲养基础上辅以静脉注射牛 织水分，放入苏丹Ⅳ染液 8min (250mL丙酮，250mL70％乙 血清 白蛋白，造成免疫损伤，建立主动脉粥样硬化模型，以期 醇，苏丹1Vo．5g)。用70％酒精分化，观察脂肪组织。 更好的模拟人类AS的病变形成过程，为这一疾病的基础研 HE染色：观察脂肪组织后 ，取主动脉弓、胸主动脉、腹主 究提供实验对象和材料。 动脉、髂动脉石蜡包埋、切片，HE染色，光镜观察病理变化。 1 材料和方法 2 结 果 1．1 实验动物与分组 2．1 大体现察 雄性清洁级金黄地 鼠30只，体重 9O～110g，南北京维通 在取材中发现对照组的主动脉柔软 ，富有弹性 ，纵切后 利华实验动物有限公 司提供 。许 可证编号 SCXK (京) 肉眼观察 内膜光滑，苏丹Ⅳ染色浅而均匀(图 1A)。模型组的 2006—009。金黄地 鼠于屏障环境饲养。动物先用普通饲料适 主动脉柔韧性差 ，粗细不均，血管壁增粗，苏丹Ⅳ染色颜色呈 应性喂养 l周，随机分为正常对照组、模型组组，每组 15只。 现黄白相间，可见黄 白色条纹或大小不等向血管管腔隆起的 1．2 i-t4~器与试剂 黄 白色斑块(图1B)。 Leica系列组织脱水、包埋、染色机 ；NikonE600光学显 2．2 病理学观察 微镜；胆固醇 (分析纯)：中西远大科技有限公司；牛血清 白蛋 实验组各部位主动脉均可见有不同程度的斑块形成，斑 白fAlbuminBovinefraetionV)：上海生物1程有限公司。 块表面有纤维组织覆盖 ，内膜 、中膜明显增厚，内皮部分脱 1．3 模型建立 落、不完整，内皮下见脂质浸润，大量泡沫细胞及炎性细胞浸 正常对照组喂饲基础饲料(金黄地鼠全价颗粒饲料)；模 润 ，平滑肌增殖并向内膜迁移 ，弹力板不连续，弹力纤维断裂 型组给与高脂饲料(O．2％胆