培养液组胺的检测及鲣鱼产组胺菌的生物活性评价.pdfVIP

第3l卷 第 1期 浙江海洋学院学报(自然科学版) Vol_31 No．7 2012年 1月 JournalofZhejiangOceanUniversity(NaturalScience) Jan．．20l2 文章编号：1008—830X(2012)01—0044—05 培养液组胺的检测及鲣鱼产组胺菌的生物活性评价 周秀锦 ，杨 建2，周向阳 ·，沈 飚 ·，吴祖芳2 (1．舟山出入境检验检疫局 ，浙江舟山 316100； 2．应用海洋生物技术教育部重点实验室，宁波大学生命科学与生物工程学院，浙江宁波 315211) 摘 要：通过直接将培养液中的组胺经丹酰氯衍生化生成稳定的物质，以l，7一二氨基庚烷为内标，建立高效液相色谱一 紫外检测器 (HPLC—VWD)方法检测培养液中的组胺 ；并研究了温度和pH对产组胺菌生长和组胺产生的影响。结果表明，培 养液中组胺的检测方法定量限为0．5~gm／L，回收率在 100％～107％，满足方法培养液中组胺的检测。经分离得到的2株产组 胺菌分别记为J2和J4，2株菌在添加L一组氨酸的胰酶大豆肉汤里均能够产生组胺；菌株J2和J4最适生长温度均为3O℃， 最适pH分别为7和6，菌株J2和J4产组胺的最适温度分别为25C和30℃，最适pH均为5，在适宜的实验条件下组胺产 生量最大值为 12．47mg／L。 关键词：培养液；组胺；检测；产组胺菌；生物活性 中图分类号：Q936 文献标识码：A DetectionHistamineinNutrientSolutionandEvaluation ofBiologicalCharacteristicsofHistamine-FormingBacteria inRawSkipjackTuna 一 一 ZHOUXiu-jin，YANGJian2,ZHOUXiang-yang，etal (1．Entry-ExitInspectionandQuarantineBureau，Zhoushan 316100； 2．FacultyofLifeScienceandBioteehnology，NingboUniversity，Ningbo 315211，China) Abstract：Histamineinnutrientsolutionisderivedwithdansylchloride，determinedbyHPLC—VWDand quantifiedbyisotopeinternalstandardmethodwith 1，7一Diamin0heptane．Histamine-fomr ingbacteriawerese- lectedfromtheprescreeningstepusingActisSidentificationmediumfrom skipjacktunatissue，andtruehis- tamineformerswereconfimr edbyHPLCmethod．EffectsoftemperatureandpH ongrowthandhistaminepr0一 ductionofhistamine-formingbacteriawerestudied．Theresultsshowedthatthelimitofdetemr inationofthe methodfornutrientsolutionis0．5~g／mL，therecoveryrangeis100％-107％；twohistaminefomr ersisolated fromskipjacktunatissuewerenamedasJ2andJ4，whichcouldproducedhistamineintryptieasesoybroth supplementedwith 1．O％ L—histidine．Theoptimaltempe