丙酮酸乙酯对缺氧／复氧损伤小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮生成及白细胞介素-1和6表达的影响.pdfVIP

·30 · InfectInflamm Rep，Vo1．10，No．1，March2009 · 论 著 · 丙酮酸 乙酯对缺氧 ／复氧损伤小鼠腹腔 巨噬细胞一氧化氮生成及 白细胞介素一1和 6表达的影响 杨 涛 颜光涛 司艺玲 王录焕 (解放军总医院基础 医学研究所生化研究室 ，北京 100853) 【摘要】 目的：探讨丙酮酸乙酯 (EP)对缺氧 ／复氧损伤小 鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (N0)及 白细胞介素一1 (I 1)、IL-6表达的影响。方法：采用原代培养小 鼠腹腔巨噬细胞和缺氧 ／复氧诱导损伤模型 ，墨汁吞噬实验鉴定巨 噬细胞纯度，于缺氧3h后复氧1、3、6、9h时收集上清液，硫代 巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)活性，采用噻唑兰法测 定其存活率 。在缺氧 3h／复氧 6h(H3／R6)损伤实验 中，细胞分为正常对照组、损伤组和加入不 同浓度 EP(20、2、 o．2mmol／L)后 的H3／R6损伤组 ，取各组细胞上清 ，硝酸还原酶法测定其 NO生成量，放射免疫分析法检测细胞上 清中I卜1、IL-6的表达 。结果：细胞培养 5d后 ，墨汁吞噬实验鉴定细胞吞噬率达 99 以上。与正常对照组相同时 间点相 比，缺氧3h后复氧1、3、6和9h时，细胞存活率明显下降，上清 中MDA含量明显增加(PO．05)，但复氧6h 组与复氧9h组问差异均无显著性。与正常对照组相 比，H3／H6损伤组 NO生成量降低 ，I 1、IL-6含量 明显升高 (P0．05)；不 同浓度EP处理后结果显示 ，0．2和 2mmol／LEP可明显促进 N0的生成，降低 IL_1和 IL6的含量 (PO．05)；而20mrnol／LEP处理可降低 N0生成 ，提高I 1和 IL-6的表达。结论 ：低浓度 EP对小鼠腹腔巨噬细 胞缺氧 ／复氧损伤有保护作用 ，其途径可能是通过上调 N0含量 ，下调 I 1和 IL-6表达水平实现的。 关键词 丙酮酸乙酯 缺氧 ／复氧 巨噬细胞 炎症因子 Effbctsofethylpyruvateon theproductionofniticoxideandexpression ofinterleukin-1and interleukin-6 in perito- nealmaerophagesafterhypoxia-reoxygenationinmice YangTao，YanGuangtao，SiYiling，eta1．ResearchLaboratoryofBiochemistry，BasicM edicalInstitute． Genera1HospitalofPLA。Beijing100853．China Correspondingauthor：YanGuangtao(Emai1：yan301@263．net) AbstractObjective：Tostudytheeffectsofethylpyruvate(EP)ontheproductionofnitricoxide(NO)andex— pressionofinterleukin一1(IL一1)andIL一6inperitonealmacrophagesafterhypoxia—reoxygenationinjuryinmice． Methods：Peritonealmacrophagesofmicewereharvestedandcultured，andtheywereusedtoreproducethehypox— ia／reoxygenationinjurymode1．Thecellswereidentifiedbyphagocytosisactivity．At1，3，6and9hoursofreoxy— genationafter3-hourhypoxia，theactivityofmalondialdehyde(MDA)andsurvivalrateofperitoneal