兔骨髓间充质干细胞的分离计量和生物学特点观察.pdfVIP

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第 27卷第 16期 第  三  军  医  大  学  学  报 Vol. 27 , No. 16 1628 2005年 8月   ACTA  ACAD EM IA E M ED IC INA E M IL ITAR IS TER TIA E   A ug. 2005 论著 文章编号 :(2005) 兔骨髓间充质干细胞的分离计量和生物学特点观察 ( ) 周  强 ,李起鸿 ,许建中   第三军医大学西南医院骨科 ,全军矫形外科中心 ,重庆 400038 ( )   提  要 : 目的 建立骨髓间充质干细胞 m e senchym al stem cells, M SC s 分离获取效果的计量方法 ;观察骨髓 M SC s在 6 体外传代培养条件下的主要生物学特点 。方法  ①梯度离心分离幼兔骨髓有核细胞 ,培养分离 M SC s, 以每 10 个骨髓有 核细胞收获第 1代 M SC s的数计量 M SC s的收获效率 ; ②传代培养 ,倒置显微镜及组织学光镜观察细胞形态 、生长特点、Ⅰ 5 2 型胶原合成及碱性磷酸酶活性等方面的变化 。结果  ①以 2 5 ×10 / cm 的密度接种骨髓有核细胞 ,经 9 ~10 d培养可收 ( ) 6 获第 1代 M SC s;第 1代 M SC s的收获总量和骨髓有核细胞的收获量呈显著的正相关 r = 0932 , P 005 ,每 10 个骨髓有 4 核细胞平均可收获第 1代 M SC s约 294 ×10 个 。②骨髓 M SC s为长梭形 ,呈紧密排列的漩涡状生长 ,在传代培养中生物 学特性无明显变化 ,均质性明显提高 ,各代 Ⅰ型胶原免疫组化均为阳性 ,碱性磷酸酶染色为阴性 。结论  ①以 25 ×105 / 2 6 cm 的骨髓有核细胞接种密度 ,收获第 1代 M SC s

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