中华眼镜蛇毒膜毒素对人类膀胱癌细胞EJ-m3作用的体外研究.pdfVIP

国际泌尿系统杂志 2009年3月第29卷第2期 InternationalJournalofUrologyandNephrology，Mar2009，Vol·29NO·2 171 · 论 著 · 中华眼镜蛇毒膜毒素对人类膀胱癌细胞 EJ—m3作用的体外研究 “ 何汇海 杨德林 王婉瑜 谢蜀生 王剑松 徐鸿毅 【摘要】 目的 研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT一12)对人膀胱癌细胞株EJ—m3的作用，并探讨其 作用机制。方法 以穿透人工基底膜能力为依据筛选具有体外高侵袭能力的膀胱癌细胞；采用四氮唑蓝 (MTY)法检测MT一12不同浓度对EJ—IIl3细胞的生长抑制率；同时流式细胞仪检测不同浓度MT一12作用 24h后细胞中趋化因子受体CXCR4的表达。结果 经过反复筛选获得膀胱癌细胞EJ的体外高侵袭力亚系， EJ—m3。MT一12可有效抑制EJ—In3细胞的生长，具有浓度依赖性特点。MT一12对 EJ—nl3作用72h的 IC50是0．66ug／mL；流式细胞仪检测结果显示，在0．125～0．5ug／mL，MT—l2组随着药物浓度的增加 CX· CR4的表达逐渐减弱 (P：O．020)。结论 MT一12可有效抑制膀胱癌细胞生长，其作用机制可能与CXCR4 在膀胱癌细胞中高表达有关。MT一12有潜力成为新的抗膀胱癌药物。 【关键司】膀胱肿瘤；肿瘤细胞，培养的；眼镜蛇毒液类 Roleinthemechanism high～invasivenessofhumanbladdercancercelllineEJ—m3 treatedbymembranetoxinfromnaianajaatravenom invitro HeHui—hai，YangDe—lin，WangWan—yu，eta1．DepartmentofUrology ，the2ndAffiliatedHospitalofKunming MedicalCollege ，Kunming650101，China Abstract Objectives Toinvestigatehteeffectsofhtemembranetoxin12(MT一12)flⅧnNajanajaatra venomonhumnabladdercancerce11EJ—to3andstudyitsmechanisms．Methods Usingaspeciallyc0nstructed invitroinvasionchambercellsthatpenetratetheMatrigelwereselectedandculturedtoestablishoffspringcelllines； ThegrowthinhibitionratesofEJ—m3 cellwereinvestigatedbyMTY methodwithvariousconcentration MT一12． chemokinereceptorCXCR4expressionswere detectedbyflowcytometryafter24hourswihtvariousconcentrationMT 一 12．Results AcquireoffspringcelllinesnimeEJ—ndcellfrombladdercancercellEJbyselectedagainanda． gain．MT一12effectivelyinhibitedthegrowthofEJ—m3cel1．which dependedonconcentration ofthedrug．The IC50after72hourswithMT一12onEJ—m3cellwere0．66ug／mL，flowcytometryresultsindicatedhtattheexpres— sionofCXCR4graduallydecreasedwithhteincreaseofMT一12dose(0．125—0．5ug／mLgroup，P=0．020)． Conclusions MT一12couldsignificnatlyinhibitthegrowthofbladdercancercells Thestrongexpressionof