农杆菌介导的转高赖氨酸蛋白基因（sb401）水稻T4代分析.pdfVIP

维普资讯 中国水稻科学(ChineseJRiceSci)，2008，22(2)：131～136 httpt}} ．ricesci．cn 农杆菌介导的转高赖氨酸蛋白基因(sb401)水稻T4代分析 李 科 王世全 吴发强 李双成 邓其明 王玲霞 梁越洋 李 平 (四川农业大学 水稻研究所 ，四川 成都 611130；四川农业大学 西南作物基 因资源与遗传 改良教育部重点实验室，四川 雅安 625014； 通讯 联系人 ，E～mail：lipingc@cngk．corn) AnalysisonT4ProgenyofTransgenicRicewithLysine-一RichProteinGene (sb401)Mediated byAgrobacteriurntumefaciensTransformation L1Ke，W ANGShb。quan，W UFa—qiang，I1Shuangcheng，DENGQ!i-ming，W ANGLing—xia，IJANGYue-yang，L1ping (RiceResearchInstitute，SichuanAgriculturalUniversity，Chengdu61II50，China；KP LaboratoryofSouthwestCropGeneticResource andImprovement，MinistryofEducation，SichuanAgriculturalU Prs ，Ya’an625014，China； C0rrPs户odfgauthor，E-mail：liping @cngk．corn) Abstract：Thelysine~richproteingenesb401hadbeensuccessfuHyintroducedintoajaponicaricevarietyNipponbareby Agrobacterium-mediatedtransformation．Outoftenindependenttransformedlines，ninehomozygousT4generationtransgenic lineswereobtainedthroughconsecutiveselfing．SouthernblottinganalysisofT4linesshowedthattheintegrationsitesofthe fmeigngenewererandom withlow copynumbers(1to3)．TAIL~PCR analysisshowedthateightT-ENA flankingsequences werelocatedonsevenchromosomes．．DetectionofproteinandaminoacidscontentsofTdlinesshowedthatsb401genecontrih— uted．ot someextent。ot theincreaseoflysineandotheraminoacidscontentsintransgeniclines．Theanalysiscombiningblov— ringendT—DNA position showedthattheexpressiondifferencewasnotobviouswhentherewerelwo copiesni transgenicrice lines． Keywords：transgenierice；positioneffect；lysine~richproteingene；thermalasymmetricinterlacepolymerasechainreac-一 tion；lysinecontent；proteincontent 摘 要：通过农杆菌介导的方法用富赖氨酸蛋 白基因(sb401)转化粳稻品种 日本晴，获得 了独立 的 1O个转化株系，对转 化株系进行连续 自交，通过筛选得到 9个纯合的T4代转化株系。Southernblotting分析发现，整合位点是随机的，并为低拷 贝(1～3个)。TAII，PCR扩增得到 8个 T—DNA侧翼序列，并定位于 日本晴的7条染色体上 。蛋 白质 和氨基酸测定分析发 现，sb401基因对各株系的蛋 白质、赖氨酸和其他氨基酸组分的提高起到了一定的作用 。将杂交结果与 T-DNA插入位置结 合分析发现，在低拷贝的情况下 ，表达量的差异不明显。 关键词 ：转基因水稻