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医用化学(无机)实验教案 重庆医科大学 了解人血清总胆固醇含量的意义 熟悉分光光度法的基本操作 掌握乙酸酐-硫酸显色测定人血清胆固醇的原理 实验二十一 人血清总胆固醇含量的测定 实验目的 1 2 3 一 二、实验原理 在乙酸酐的作用下,胆固醇脱水生成脱水胆固醇,后者与硫酸结合生成显绿色的胆固醇二烯单磺酸,在600nm波长有最大吸收。为此,可利用此性质,采用分光光度法测定血清胆固醇的总含量。其反应式如下: 三、实验仪器与试剂 仪器 试剂 水浴箱,UV-2102PC型紫外-可见分光光度计,100mL容量瓶,10mL吸量管,试管 2mg·mL-1标准胆固醇溶液,乙酸酐-硫酸显色剂,浓硫酸 Creativity 四、实验操作 1 2 3 标准胆固醇溶液的配制 乙酸酐-硫酸显色剂的配制 吸光度测定 1 2 3 用空白溶液作参比,每次测定前要用参比调节分光光度计的零点 理解计算血清总胆固醇的公式。 最大吸收波长下测定标准溶液的吸光度 五、 操作要点和注意事项 1、测定人血清总胆固醇有何意义? 3、本实验中的空白溶液,标准溶液和未知溶液是如何配置的? 2、其显色反应基于什么原理? 六、思考题
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