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食品生物化学 实验十 α- 淀粉酶活力的测定 一、实验目的要求 1.进一步熟悉α-淀粉酶的特性。 2.掌握测定α-淀粉酶活力的方法。 二、实验原理 α-淀粉酶(液化型淀粉酶)能催化淀粉水解,生成分子较小的糊精和少量的麦芽糖及葡萄糖。本实验利用碘的呈色反应来测定液化型淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定淀粉酶活力的大小。 食品生物化学 三、器材 多孔白瓷板、50mL三角瓶或大试管(25×200)、恒温水浴箱、烧杯、容量瓶、漏斗、吸管。 四、试剂 原碘液、碘液、标准“终点色”溶液、2%可溶性淀粉、0.02mol/L、pH6.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、α-淀粉酶粉或酶液。 五、操作步骤 1.待测酶液的制备 2.测定 食品生物化学 六、计算 lg酶粉或lmL酶液于60℃pH6.0的条件下,1h液化可溶性淀粉的克数,称为液化型淀粉酶的活力单位数。 式中n——酶粉稀释倍数; 60——1h(60min); 0.5——吸取待测酶液的量,mL; 20×2%——可溶性淀粉的量,g; T——反应时间,min; m——酶粉质量(或酶液体积),g(mL)。 食品生物化学 七、说明 1.酶反应时间应控制在2~2.5min,否则应改变稀释倍数重新测定。 2.实验中,吸取2%可溶性淀粉及酶液的量必须准确,否则误差较大。 食品生物化学 实验十一 维生素C的性质实验 一、实验目的要求 1.了解维生素C的主要性质。 2.通过比较得出不同条件对维生素C稳定性的影响。 二、实验原理 维生素C易溶于水、呈酸性、有还原性及不稳定性,易被碱、高温、金属离子 ( 如Cu2+,Fe2+ 等)、氧及L-抗坏血酸氧化酶等因素破坏。 食品生物化学 还原型抗坏血酸可以还原染料2,6-二氯酚靛酚。2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉红色,在中性或碱性溶液中呈蓝色,被还原后颜色消失。还原型抗坏血酸还原染料后,本身被氧化成脱氢型抗坏血酸。在酸性环境下用氧化型2,6-二氯酚靛酚滴定还原型维生素C,以微红色作为滴定终点,根据2,6-二氯酚靛酚的消耗量,可以计算出抗坏血酸的含量。 三、原料与器材 黄瓜或南瓜、玻璃片、乳钵、石英砂、纱布、滴定管、容量瓶、50 mL锥形瓶。 四、试剂 0.1% 的维生素C溶液、2 mol/L Na2CO3溶液、2% 草酸溶液、5% CuSO4溶液、 2,6-二氯酚靛酚溶液 食品生物化学 五、操作步骤 1.抗坏血酸氧化酶的制备 2.酸、碱、铜、加热及抗坏血酸氧化酶等条件对维生素C的影响 式中V1—酸性条件下滴定消耗2,6-二氯酚靛酚的体积,mL; V2—其他条件下滴定消耗2,6-二氯酚靛酚的体积,mL。 食品生物化学 实验十二 脂肪转化为糖的定性实验 一、实验目的要求 学习和了解生物体内脂肪转化为糖的过程和检验方法。 二、实验原理 糖和脂肪的代谢是相互联系的,它们可以相互转化。本实验以休眠的蓖麻种子和蓖麻的黄化幼苗为材料,定性地了解蓖麻种子内贮存的大量脂肪转化为黄化幼苗中还原糖的现象。 食品生物化学 三、原料与器材 实验材料:蓖麻籽、蓖麻的黄化幼苗(在 20℃暗室中培养 8 天 )。 仪器:试管及试管架、试管夹、研钵、白瓷板、烧杯 (l00mL)、小漏斗、吸量管、吸量管架、量筒、水浴锅、铁三角架、石棉网。 四、试剂 费林试剂、碘化钾-碘溶液(碘试剂) 五、操作步骤 食品生物化学 实验一 水分活度的测定 实验二 还原糖含量的测定 实验三 淀粉的提取和性质实验氨基酸的纸上层析 实验四 动植物油脂中不饱和脂肪酸的比较实验 实验五 油脂酸价的测定 实验六 氨基酸的纸色谱 实验七 从牛奶中制取酪蛋白 实验八 动物肝脏DNA的提取与检测 实验九 酶的底物专一性实验 实验十 α- 淀粉酶活力的测定 实验十一 维生素C的性质实验 实验十二 脂肪转化为糖的定性实验 第十章 实验指导 食品生物化学 实验一 水分活度的测定 一、实验目
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