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目
录
英文缩略词表……………………………………………………………1
中文摘要…………………………………………………………………2
英文摘要…………………………………………………………………4
前言………………………………………………………………………6
材料与方法………………………………………………………………7
结果………………………………………………………………………13
讨论………………………………………………………………………14
结论………………………………………………………………………21
参考文献…………………………………………………………………21
个人简历…………………………………………………………………25
致谢………………………………………………………………………26
综述………………………………………………………………………27
英文缩写一览表
英文缩写
Bp
英文全称
Base pair
中文全称
碱基对
BSP
Bisulfite sequence polymerase chain 亚硫酸氢盐修饰后测序
reaction
DNA
dNTP
DNMT
EB
EDNRB
5mC
Deoxyribonucleic acid
Deoxyribonucleoside triphosphate
DNA methylation transferase
Ethedium bromide
Endouthelin Receptor B gene
5methylated cytosine
脱氧核糖核苷酸
脱氧核糖核苷三磷酸
DNA 甲基转移酶
溴化乙锭
内皮素受体 B 基因
5 甲基胞嘧啶
5mCpG
5′methylated
cytosine
phosphate 5′CpG 岛甲基化
guanosine
MSP
Methylation specific polymerase chain 甲基化特异性聚合酶链应
reaction
nPCR
SAM
Taq
Nest Polymerase chain reaction
S-adenosylmethionine
Taq DNA polymerase
—1—
巢氏聚合链反应
S-腺苷甲硫氨酸
耐热 DNA 聚合酶
脑胶质瘤中 EDNRB 基因甲基化状态的研究
中文摘要
目的
抑癌基因启动子区异常甲基化是表观遗传学重要机制之一,参与了脑胶质瘤
的发生发展。本研究采用巢氏 PCR(nMSP 法)和亚硫酸氢盐修饰后测序法(BSP 法)
方法检测手术切除脑胶质瘤组织中候选抑癌基因 EDNRB 基因启动子区甲基化状
态,探讨 EDNRB 基因启动子的异常甲基化水平在脑胶质瘤发生发展中的作用以及
与临床病病理资料之间的关系。
方法
选取经病理证实的 20 例脑胶质瘤患者,术前均未行放疗和化疗,收集切除的
肿瘤组织。同时收集 2 例脑挫裂伤患者正常脑组织进行对照,应用 nPCR 方法和
BSP 方法检测标本中 EDNRB 基因启动子区 CpG 岛的甲基化状态。
结果
1.EDNRB 基因启动子区 CpG 岛的异常甲基化
正常脑组织未见甲基化,低级别(I-II 级)胶质瘤中 EDNRB 基因启动子甲基化
率为 42.86%(3/7),而高级别组(Ⅲ-IV 级) EDNRB 基因启动子甲基化率为 33.33%
(3/9),通过分析表明两者之间无明显差别(X2=0.152.402, P=0.696),患者年龄、性
别、肿瘤病理类型、肿瘤大小和肿瘤部位等因素与 EDNRB 基因甲基化无明显相关。
—2—
结论
EDNRB 基因的甲基化是肿瘤发生的早期事件,EDNRB 基因甲基化在脑胶质
瘤中较为普遍,与肿瘤进展基本无关。本研究没有发现 EDNRB 基因甲基化与患者
的年龄、性别、肿瘤病理类型、肿瘤大小等因素相关。
关键词:内皮素受体 B 基因;启动子;甲基化;脑胶质瘤
—3—
Methylation of EDNRB gene in glioma
Abstract
Object:Methylation of Tumor-suppressor gene promoter is one of the important
epigenetics mechanisms, participating in the glioma events. This study adopts nest PCR
(nPCR) and hydrogen sulfite salt after modification sequencing method (BSP method)
detecting candidated tumor-s
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