出口水果、蔬菜中福美双残留量检验方法 编制说明.docVIP

进出口水果、蔬菜中福美双残留量检测方法 编制说明 一、任务来源 国家认监委下达的修改制订2009年行业标准《出口水果、蔬菜中福美双残留量检测方法》任务，计划编号为2008B261r。本标准由深圳出入境检验检疫局负责起草。 二、方法概述 福美双 (thiram) 是一种有机硫类保护性广谱杀菌剂，其化学名称为双(二甲基硫代氨基甲酰基) 二硫化物，分子式为(CH3)2NCSS2CSN(CH3)2，分子量为 240.43。福美双对葡萄孢菌、黑星病菌、疫霉菌、根霉菌及丝核菌等都有活性，主要用于处理种子和土壤，防治禾谷类黑穗病和多种作物的苗期立枯病，也可用于喷洒，防治一些果树，蔬菜病害。根据查询，目前我国尚未对福美双的最大残留限量作出规定，欧盟、美国均对其作出限量要求。福美双的结构及限量信息见表1。 表 1 福美双基本结构及限量信息 名称 Cas 结构图 限量 福美双 thiram 137-26-8 中国、日本：未规定 美国：7ppm（草莓，苹果，桃） 欧盟：3 ppm (水果、蔬菜) 加拿大：香蕉1ppm，芹菜7 ppm 澳大利亚：香蕉2ppm，芹菜5ppm 法国：2ppm（茄属） 我国现有的食品中福美双检测标准有四项，分别为《SN 0525-1996 出口水果、蔬菜中福美双残留量检验方法》、《SN 0157-92 出口水果中二硫代氨基甲酸酯残留量检验方法》、《SN/T 1541-2005 出口茶叶中二硫代氨基甲酸酯总残留量检验方法》及地方标准《DB11/T 379-2006 豆芽中4-氯苯氧乙酸钠 6-苄基腺嘌呤 2,4-滴 赤霉素 福美双的测定》。SN 0525-1996 所采用的方法为分光光度法，其原理是利用福美双与碘化铜反应生成具有紫外吸收的二甲基二硫代氨基甲酸铜；其他标准所采用方法均为气相色谱法，其原理是利用二硫代氨基甲酸酯在还原性酸中分解生成二硫化碳，再用气相分析。目前尚未见到食品中福美双的液相色谱及液相色谱-质谱检测相关标准。通过文献调研，目前国内外均有较多福美双相关的检测文献。国内主要是利用液相色谱作为分析手段。如宋国春等确立了用二氯甲烷提取，弗罗里硅土和中性氧化铝柱净化，用 SPD - 10A 紫外检测器检测棉叶、棉籽和土壤中福美双残留量的高效液相色谱分析方法，添加回收率为棉叶 78. 3 % ~ 84. 3 %、棉籽 7 7. 0 % ~ 81. 6 %、土壤 77. 5 % ~ 93. 8 %；最低检出浓度在0. 025 ～0. 05mg/ kg[1]；李薇等采用反相高效液相色谱法，同柱测定多菌灵和福美双，此方法的标准偏差分别为 0.0871 和0.0697；RSD 分别为 0.35 % 和 0.28 %；平均回收率分别为 99.96 %和 99.87 %[2]。国外对福美双的研究多采用液相色谱、气相色谱及液质联用法。如C. Blasco 等利用基质固相分散和固相萃取法结合LC-APCI-MS分析植物样品中的多种二硫代氨基甲酸盐，回收率为 33% ~ 109%，定量低限为 0.25 ~ 2.5 mg/kg[3]；J. S. Aulakh等利用液相色谱同时测定谷物中的福美双和硫脲，检出限为5.2 ppb and 4.9 ppb[4]。 综上所述，目前食品中福美双的测定方法多样，主要包括分光光度法、液相色谱法、气相色谱法及液质联用法等。分光光度法是一种间接测定福美双的方法，其选择性较差，易受到多种离子的干扰，且提取过程需用到大量有毒试剂；气相色谱法较高灵敏，但该法只能测定二硫代氨基甲酸酯类农药的总量，无法单独选择测定福美双，且有可能受到基质干扰，并不足以满足检验检疫监管需求。液相色谱和液相色谱-质谱法具有足够的灵敏度和选择性，本标准计划采用液相色谱法和液相色谱-质谱法作为福美双的检测方法，标准的完成将能够建立满足检验检疫监管需求的福美双定量测定及质谱确证检测方法。 三. 方法建立 福美双对热不稳定，因此建议保证提取环境温度控制在 25℃ 以内。本方法的原理是直接提取水果及蔬菜的福美双，经浓缩后用HPLC及HPLC-MS/MS测定。与GC方法比较，此种方法的优点在于是直接提取，测定福美双的残留量，抗干扰能力强，而GC法是间接测定，所测结果并非残留量，不利于执法判断；本标准方法的缺点是于福美双在多数水果及蔬菜基质中并不稳定，方法的回收率不够高，且并不适用于所有水果蔬菜基质的测定，如高果酸水果等。 1提取方法的选择及优化 1.1 提取溶剂的选择 文献报道中福美双提取试剂多为氯仿及二氯甲烷，也有文献使用水作为提取试剂。本标准先以梨作为基质，比较用水、甲醇、乙腈、丙酮及氯仿作为提取溶剂的效果。结果表明，水和甲醇作为提取试剂无法充分提取福美双，乙腈和丙酮能够充分提取基质样品中的残留，如图1。实验发现以三氯甲烷作为试剂，在