国境口岸沙门氏菌、志贺氏菌、O157：H7的三重实时荧光PCR检测方法 编制说明.docVIP

编制说明 1 基本信息 1.1 标准草案名称 中文 国境口岸沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7的三重荧光PCR检测方法 英文 Detection of Salmonella, Shigella, and Escherichia coli O157:H7 with triplex real-time PCR at frontier ports 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 □等同 修改 非等效 标准号 英文名称中文名称批准立项的文件名称和文件号 国家认监委关于下达2012年第五批出入境检验检疫行业标准制(修)订计划项目的通知国认科〔2012〕86号计划编号 2012B157修订年月～年月salmonella）、志贺氏菌(Shigella)、肠出血性大肠杆菌（Enterohaemorrhagic E．coli，EHEC）O157:H7均为革兰氏阴性菌，属肠杆菌科，广泛分布于自然界，极易污染食品和水源，是最常见的食源性病原微生物。人群对这三种致病菌普遍易感，通过污染了的食物、饮水等经口感染，进而引起食物中毒，重症者可致死，严重危害人类身体健康，已成为全球性的公共卫生问题。 人感染沙门氏菌后，可引起胃肠炎、伤寒、败血症及肠外灶性感染等多种症候群，甚至可导致严重脱水以及急性肾功能衰竭而亡，同时婴儿的脑膜易受侵犯，病死率可高达80%。据统计，在世界各国的细菌性食物中毒中，沙门氏菌常列榜首，每年大约有1000人死于急性沙门氏菌感染，仅美国每年报告的沙门氏菌感染就有40000例。在我国细菌性食物中毒70 -80%也是由沙门氏菌引起；志贺氏菌能引起人类细菌性痢疾，一般病情较重，以全身中毒症状和下部大肠化脓性炎症为主要特征，严重者可发生感染性休克和(或)中毒性脑病，全世界每年有16470万例感染志贺氏菌的病例，有110万人因此而死亡，其中69％是不满5岁的儿童，以发展中国家为甚；大肠杆菌O157:H7可致人腹泻、出血性结肠炎，5%-10%的病例并发溶血性尿毒综合征（HUS）及血栓性血小板减少紫癜(TTP)等，HUS病死率为5%，TTP病死率为50%。该病曾多次在美国、日本、加拿大、英国等国家爆发流行，近年来亦有逐步上升的趋势，许多国家已将其列为法定报告传染病。我国江苏、安徽也曾于1999年暴发流行O157:H7感染性腹泻，山东、江苏、福建、浙江、上海和广东等地亦先后检测到该菌。随着经济的发展，国与国之间的交流日益频繁，人群流动增多，使得沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7等常见食源性致病菌的传播风险不断升高，为了保障出入境人员的健康安全以及防止疫情的传入，亟需加强和提高国境口岸对这些细菌性腹泻病的诊断能力，建立快速、准确的检测方法。 目前细菌性腹泻病的确诊需要以实验室诊断为依据，然而传统的细菌分离培养、血清学鉴定、生化鉴定法过程复杂，周期长，相比之下，近年来发展起来的荧光PCR检测技术以其更高的特异性和灵敏度、更加便捷的操作以及高通量、闭管检测等优势，更加适合于口岸快速、大量的检测需求，而多重荧光PCR更是能实现一管检多个病原体，具有更高的效率，可以极大的方便出入境口岸对腹泻病的筛查诊断，因此，申请者特申请针对沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7三种常见的腹泻致病菌制订“国境口岸沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7的三重实时荧光PCR检测”标准。 2.2 与国内外相关标准、文献的关系 目前国内针对沙门氏菌的荧光PCR标准有《SN/T 2415-2010 进出口乳及乳制品中沙门氏菌快速检测方法实时荧光PCR法》、《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》以及《SN/T 1870-2007 食品中致病菌检测方法 实时PCR法》，均是针对食品检疫。志贺氏菌和大肠杆菌0157:H7的荧光PCR标准均仅有《SN/T 1870-2007 食品中致病菌检测方法 实时PCR法》这一个，同样是针对食品检疫。 主要参考文献： 1、李光伟, 邱杨, 肖性龙等. 沙门氏菌荧光实时定量PCR检测试剂的研制及应用[J]. 微生物学通报, 2007, 34(3): 496-499. 2、刘华伟, 马立农, 郭蔼光等. 畜产品中沙门氏菌的快速检测[J]. 西北农业学报, 2004, 13(4): 32-36. 3、邱杨, 唐丽霞, 赵丽等. 志贺氏菌实时荧光PCR检测试剂的研制[J]. 现代食品科技, 2008, 24(11): 1151-1154. 4、苏明权, 杨柳, 马越云等. 实时荧光定量PCR检测志贺氏菌方法的实验研究[J]. 现代检验医学杂志, 2009, 24(6): 39-45. 5、徐伟, 刘军, 李素. 芳单增李斯特菌与志贺氏菌多重PCR检测技术的建立[J]