海产品中有机硒、蛋白硒、多糖硒和核酸硒的测定.docVIP

ICS发布 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第一部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局、浙江工商大学。 本标准主要起草人： 鲁丹、张虹、俞琰垒、徐庆兵、郭利攀 海产品中有机硒和无机硒的测定 氢化物发生原子荧光光谱法 1 范围 本标准规定了海产品中总硒和无机硒的氢化物发生原子荧光光谱测定方法，有机硒由总硒减去无机硒得到。 本标准适用于海产品中有机硒和无机硒的测定。 本标准测定范围为0.01 mg/kg～4.00 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 5009.93 食品安全国家标准 食品中硒的测定(第一法 氢化物原子荧光光谱法) GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 海产品中的硒以不同的化学形式存在，包括无机硒和有机硒。试样中无机硒经(1+1)盐酸水浴条件下振荡提取，与有机硒分离，用氢化物发生原子荧光光谱法测定无机硒含量。有机硒含量由总硒含量减去无机硒含量得到。 4 试剂和材料 除非另有规定，本方法所使用的试剂均为优级纯，实验用水应符合GB/T 6682中规定的一级水。 4.1 盐酸(ρ 1.19 g/mL)。 4.2 盐酸(1+1)：吸取50 mL盐酸(4.1)缓慢加入40 mL水中，冷却后用水定容至100 mL。 4.3 盐酸(2+98)：吸取2 mL盐酸(4.1)缓慢加入80 mL水中，冷却后用水定容至100 mL。 4.4 氢氧化钠(5 g/L)：称取5.0 g氢氧化钠溶于水中，冷却后用水定容至1000 mL。 4.5 硼氢化钠(10 g/L)：称取10.0 g硼氢化钠溶于氢氧化钠(4.4)中，用氢氧化钠(4.4)定容至1000 mL。 4.6 铁氰化钾(100 g/L):称取10.0 g铁氰化钾溶于水中，用水定容至100 mL，摇匀。 4.7 硒标准储备液(1000 μg/mL)：各元素标准溶液按GB/T 602-2002 方法配制，或直接使用市售有证国家标准溶液。 4.8 硒标准应用液(1.0 μg/mL)：由硒标准储备液(4.7)以盐酸(4.3)逐级稀释而成。 4.9 环己烷。 4.10 正辛醇。 4.11 氩气：纯度≥99.99%。 5 仪器和设备 5.1 原子荧光光度计，附硒空心阴极灯。 5.2 恒温水浴振荡器。 5.3 电热板。 5.4 组织捣碎机。 6 分析步骤 6.1 试样制备 取代表性样品约500 g，取其可食部分切碎后，用捣碎机将样品打成浆状，混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。 6.2 试样保存 试样于-18℃下保存。 在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染。 6.3 总硒的测定 总硒的试样制备按6.1执行，测定按GB 5009.93食品中硒的测定(第一法 氢化物原子荧光光谱法)进行。 无机硒的测定 6.4.1 试样处理 称取2.5 g试样(6.1)(精确到0.001 g)置于25 mL具塞刻度试管中，加入盐酸(4.2)20.00 mL，并用盐酸(4.2)定容至25 mL，混匀，置于60℃恒温水浴中200 r/min振荡浸提18 h，取出冷却至室温，再经脱脂棉过滤。将滤液倒入分液漏斗中，加入5 mL环己烷(4.9)萃取，收集水相于烧杯中。准确吸取4.00 mL水相于10 mL具塞刻度试管中，置于沸水浴中20min，取出冷却至室温，分别加入1.0 mL铁氰化钾(4.6)、3滴正辛醇(4.10)， 用水定容至10mL，摇匀待测。 6.4.2 空白试验 除不称取试样外，均按上述步骤6.4.1进行。 6.4.3 标准工作溶液的配制 分别准确吸取硒标准应用液(4.8)0.00、0.050、0.200、0.400、0.60、1.00 mL于50 mL容量瓶中，分别加入10 mL盐酸(4.1)、5.0 mL铁氰化钾(4.6)、3滴正辛醇(4.10)，用水稀释并定容至刻度，摇匀待测。硒标准工作溶液浓度见表1。 表1 硒标准工作溶液 单位：μg/L 硒标准工作溶液 0 1.00 4.00 8.00 12.0 20.0 注：标准工作溶液中硒的具体浓度可根据仪器的灵敏度及样品中硒的实际含量作适当调整。 6.4.4 测定 6.4.4