家蚕微孢子虫病检疫技术规范 编制说明.docVIP

出入境检验检疫行业标准编制说明 1 基本信息 1.1 标准名称 中文 英文 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 □等同 □修改 □非等效 标准号 —— 英文名称 —— 中文名称 —— 说明 （适用于修改和非等效） 1.3 任务来源 批准文号 国认科[ 201 ] 36号 计划编号 2012B039 1.4 制（修）订情况 ■制订 □修订 替代的标准编号 —— 1.5 起止时间 2012年01月～ 201年 12月 1.6 主要起草单位 浙江出入境检验检疫局 1.7 主要起草人 1.8 专业类别 □管理；■动物检疫；□植物检疫；□食品检验；□卫生检疫；□化矿金；□机电；□轻工；□纺织；□包装与危化；□鉴定 1.9 标准体系表代码 1.10 调整情况 无 2 背景情况 2.1 国内外现行法律法规要求，国际贸易、疫病疫情、质量安全等检验检疫业务需求情况 桑蚕微粒子病（Pebrine）是由蚕微孢子虫（Nosema bombycis）引起的能致蚕业生产毁灭性破坏的疫病。3～4μm×1.5～2μm可在蚕卵、幼虫、茧和蛾（成虫）四个虫态中均可寄生，能经蚕卵垂直传染19世纪中叶发生于法国，法国、意大利等欧洲主要养蚕国家曾因该病的暴发而导致蚕丝业的毁灭。我国近几年每年因微粒子病而淘汰的各级原种约300万张之多，直接经济损失达数亿元之巨。鉴于此，家蚕微粒子病是蚕病监控和防治的重点，在《中华人民共和国进境动物一、二类传染病、寄生虫病名录》中被列为二类传染病，也是目前进出境蚕唯一的检疫性疫病。我国是世界第一养蚕大国。在蚕的进出口贸易中以蚕种（卵）等生物活体的贸易为主。1870年Pasteur创立母峨袋检法以来，母峨微孢子虫的光学显微镜检验方法一直应用至今，国内蚕业生产以母蛾微孢子虫检测为主。本规范引入了聚合酶链式反应（PCR）和实时荧光PCR方法，PCR法是以小亚单位核糖体RNA特定基因为靶标进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。实时荧光PCR法通过检测扩增曲线，以确定样品中是否含有蚕微孢子虫核酸，可以极大地提高检测的灵敏度和特异性。我们制定桑蚕微粒子病检疫技术规程，同时兼顾到四个虫态的检疫，对保障我国蚕业生产的安全，保证我国家蚕产品（蚕种等）的顺利出口，突破技术壁垒，促进外向型蚕业经济发展，为进出口检疫提供技术保障，防止桑蚕微粒子病传入和传出具有重要意义。 2.2 与国内外技术法规、相关标准及其他规范性文件关系情况（适用于规程、规范类标准） DB33/217.1-2007《桑蚕种质量》DB33/T 217.3-2007《桑蚕种 第3部分：桑蚕种母蛾检疫规程》NY 327-1997《桑蚕一代杂交种检验规程》SN/T 1660-2005《出口蚕种检验检疫规程》SN/T 2972-2011《蚕检验检疫监管规程》GB/T 20395-2006《桑蚕微粒子病病原鉴定方法》Dong S, Shen Z, Xu L, Zhu F,2010. Sequence and phylogenetic analysis of SSU rRNA gene of five microsporidia. Curr Microbiol. 60(1):30-37. 3、Hatakeyama Y, Hayasaka S, 2003. A new method of pebrine inspection of silkworm egg using multiprimer PCR. Journal of Invertebrate Pathology， 82：148151 5、刘吉平，曹阳，Smith JE, 徐兴耀. 2004. 模拟感染家蚕微粒子病的PCR分子诊断技术研究. 中国农业科学，37(12)：1925-1931 6、邱宝利，徐兴耀，牟志美 2002. 核酸分子杂交技术鉴别和检测家蚕微孢子虫的研究山东农业大学学报自然科学版，33（1）14-18] 7、张志芳，沈中元,何家禄, 2000. 微孢子虫研究进展．蚕业科学，26(1)：38-44] 8、陈秀，黄可威, 沈中元, 王红林, 黄君霆, 等,1996.家蚕微粒子病的PCR诊断技术研究. 蚕业科学, 22(4):229-234. 9、何永强吴 姗鲁兴萌张 弘邱海洪帅江冰王素华张晓峰徐国群李光才董 强家蚕微孢子虫荧光定量PCR检测方法PCR检测技术研究与应用，蚕业科学，2011，37(5)：0878—0882 13、蔡顺风，何欣怡，何祥康，邱海洪，李光才，何永强，鲁兴萌，一种快速高效制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法，蚕业科学，2011，37(6)：1019—1024 14、蔡顺风，何祥康，何欣怡，马焕艳，孟祥坤，邱海洪，何永强，鲁兴