NY_T 946-2006 蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量测定.docVIP

蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中 仲丁胺残留量测定 Determination of sec-butylamine residues in garlic sprout Green pepper orange and grape 2006-01-26 发布 2006-04-01 实施 前 言 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。 本标准起草单位：沈阳农业大学、辽宁省乡镇企业信息咨询服务中心。 本标准主要起草人：纪淑娟、马岩松、吴胡、杨洪嘉、车芙蓉、何晓晗、李江阔。 蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量测定 1 范围 本标准规定了蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺(2-AB)残留量的检测方法。 本标准适用于蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量的测定，其他果品蔬菜中仲丁胺残留量的测定可参照本标准。 本方法的最低检出限量为0．672mg／kg，测定浓度范围为0．672mg,／kg一20．000mg／kg。 2 原理 通过水蒸气蒸馏，将样品中仲丁胺和其他挥发性胺类分离，用四氯化碳(CCl4)洗涤，除去干扰物质，在硼砂缓冲液中2-AB与2，4—二硝基氟苯(DNFB)反应，生成N—仲丁基—2，4—二硝基苯胺(BDNA)，加碱水解除去多余试剂，用环己烷萃取BDNA，经薄层色谱分离、净化，将2-AB色斑用三氯甲烷溶脱，用紫外/可见分光光度计在332DAmI处测定。 3试剂与材料 除非另有说明，所用的试剂均为分析纯，所用的水均为无离子水 3．1 氧化镁固体 3．2 无水硫酸钠 3．3 正己烷 3．4 乙醚 3．5 三氯甲烷 3．6 四氯化碳 3．7 苯 3．8 1，4-二氧六环 3．9 1mol／L氯化钙溶液 称取氯化钙(CaCl2)110．9g，溶于水中，定容至1000mL。 3．10 0．05mol/L 四硼酸钠 精确称取四硼酸钠19．07g，溶于蒸馏水，定容至1 000mL。 3．11 0．2mol／L硼酸 精确称取硼酸12．37g，溶于蒸馏水，定容至1000mL。 3．12 硼酸盐缓冲液 将硼砂溶液与硼酸溶液按8+2比例混合制成硼酸盐缓冲液。 3．13 2mol／L氢氧化钠溶液 准确称取8．00g氢氧化钠(NaOH)，溶解定容于100mL蒸馏水 3．14 0．3mol／L氢氧化钠溶液 准确称取1．20g氢氧化钠(NaOH)，溶解定容于100mL蒸馏水 3．15 0．05mol／L碳酸钠溶液 准确称取5.30g碳酸钠（Na2CO3）,溶解定容于1000ml蒸馏水3．16 0．15mol／L硫酸溶液 准确吸取9mL硫酸(H2m4)，溶解定容于1 000mL蒸馏水。 3．17 2，4-Z硝基氟苯(DNFB) 在50mL蒸馏后的1，4—二氧六环中溶解0．75mL2，4—二硝基氟苯(2，4—dinitrofluorobenzene)(简称DNFB)(当天配制)。 3．18 环己烷 将500mL环己烷通过长125mm、直径25mm、填充粒径为0．2mm一0．5mm硅胶的层析柱层析，弃去开始的25mL，其余收集于干燥洁净的试剂瓶中。 3．19 仲丁胺标准溶液(100μg／mL) 精确吸取14ltl标准仲丁胺原液，用蒸馏水定容至100mL。 3．20 仲丁胺标准使用液(100μg／mL) 精确吸取上述仲丁胺标准溶液10mL，用蒸馏水定容至100mL。 4 仪器 4．1 高速电动组织捣碎机； 4，2 恒温水浴锅(60℃±2℃)； 4．3 水蒸气蒸馏装置； 4，4 薄层板：硅胶G(0．25mm)； 4．5 紫外—可见分光光度计； 4．6旋转蒸发仪。 5 操作方法 5．1 样品处理 将果蔬样品切成小块，用组织捣碎机捣成浆状，称取50g匀浆，精确到0．1g，置于800mL蒸馏拖中，依次加入75mLlmol／L CaCU溶液、10gMgO与50mL水制成的浆状物，并用100mL水冲洗瓶壁转动使之混合均匀。将蒸馏瓶连到水蒸气蒸馏装置上进行蒸馏，用装有10mL0．15mol／LH2SO4溶液的带刻度的100mL烧杯接收馏出液约80mL，再用0．3mol／L NaOH溶液将蒸馏液调到pH=7(用pH计)，最后用蒸馏水定容至100mL备用。 5，2 标准工作曲线的绘制 5，2．1 吸取仲丁胺标准使用液(3．19)0．0mL、1．0mL、2．0mL、4．0mL、6．0mL、8．0mL和10．0mL(相当于0．0μg、10．0μg、20．0μg、40．0μg、60．0μg、80．0μg、100．0μg)，分别