斜带石斑鱼催乳素受体（PRLR）基因组DNA及其5’旁侧序列克隆和PRLR表达研究.pdf

摘 要 催乳素受体(Prolactin 胞因子受体超家族。PRL在体内有多种功能，这些功能都是通过PRLR介导引起 信号传导而实现的。 通过GenomeWalkerPCR和基因组PCR，我们成功地获得了斜带石斑鱼 包含9个外显子，8个内含子。转录起始位点位于外显子2上，转录终止位点位 于外显子9上。在已获得的5’旁侧区序列上，没有TATAbox序列，但存在转录 相似。 的转录产物，其在肠和鳃表达量较高，在卵巢表达量比较微弱。此外，在鳃丝中 RT-PCR结合Southernblot分析，我们进一步研究了PRLR在斜带石斑鱼不同组 织和早期发育时期的表达情况。结果显示：在我们检测的组织中，PRLR都有表 达。在垂体、皮肤、鳃丝中表达量最高，鳃弓、中肠、后肠、胃、性腺、脂肪表 达量也较高，各脑区包括嗅球、端脑、中脑、小脑、下丘脑、延脑，和骨、肌肉、 前肠、心脏、肝脏、肾脏、 脾脏表达量则相对较低。在斜带石斑鱼早期发育时 期，我们检测的各时期PRLR均有表达，在原肠后期，胚体形成期，心脏跳动期， 和尾芽期表达量相对较高。 关键词：斜带石斑鱼(印inephelus 侧区序列、基因结构、基因表达 Abstract a that toclass1 is transmembrane The belongs prolactinreceptorsingle protein ofthe mediatesactionsofPRL the cytokinereceptorsuperfamily．PRLR bytriggering events． postreceptorsingal The PRLR andits ofthe full—lengthgenes 5-flankingregion orange-spotted were cloned PCRandGenomeWalkerPCR．The groupersuccessfullybygenome 9exonsand8 PRLRisabout contains orange—spottedgroupergene 10199bp，which introns．ThestartcodeofPRLRisontheexon the codeisonthe gene 3，and stop TATAboxwasfoundinthe ofPRLR thereare exon9．No 5’flankingregion gene，but sitesfor factors C／EBPI，andSpl． binding transcriptional putative blot revealeda of237 Northern kb，withhigherexpression analysis transcript levelsinthe and lowerlevelinthe more intestin