新型IL10抑制剂对睡眠剥夺大鼠的影响.DOCVIP

临床医学论文-新型IL10抑制剂对睡眠剥夺大鼠的影响 【摘要】? 目的 研究不同剂量AS101对于6 h睡眠剥夺后大鼠睡眠觉醒周期的影响。方法 采用脑立体定位、脑电图、肌电图记录方法观察AS101对于睡眠剥夺大鼠睡眠反跳的影响。结果 6 h睡眠剥夺后，与注射缓冲液组（PBS）大鼠比较，0.5 mg/kg AS101可以增加觉醒时间和减少慢波睡眠时间，可将快眼动睡眠从(54.53±14.61)min减少到(34.4±17.34)min(P＜0.05)。结论 AS101可能参与大鼠睡眠觉醒周期的调节。 【关键词】? IL10 抑制剂；AS101睡眠；脑电图记录? 睡眠剥夺对于机体代谢、免疫、内分泌等功能有不同程度的影响。睡眠剥夺之后出现的睡眠增加现象称为反跳 (rebound)。大量研究已经发现了细胞因子尤其是白介素1（IL1）和肿瘤坏死因子（TNF）参与睡眠剥夺后的睡眠反跳作用。有研究发现IL1的产量与睡眠有关，在慢波睡眠（SWS）期间活性达峰值，在睡眠剥夺期间产量增多。IL1受体拮抗剂或抗IL1抗体在抑制内源性IL1活性的同时，可抑制兔的自发睡眠，还可抑制睡眠剥夺后“反跳现象”的出现〔1〕。临床上的许多感染性疾病患者都有睡眠受限制的症状，这表明细胞因子可能在其中发挥作用。AS101是一种新型的IL10抑制剂并可以刺激IL1β的释放〔2〕。大量研究都集中于它对血液系统疾病的作用，忽略了它可能对睡眠相关疾病的作用。本研究旨在探讨不同剂量AS101对睡眠剥夺大鼠睡眠反跳的影响，为临床治疗睡眠相关疾病提供一条新的途径。 ??? 1? 材料与方法 ??? 1.1? 动物手术? 本实验采用SD雄性大鼠14只，体重350～400 g由宾夕法尼亚州立大学实验动物中心提供。随机分为两组：对照组（n=8）和AS101组（n=6）。用65%氯胺酮（katamine）和35%甲苯噻嗪（xylazine），0.2 ml／100 g麻醉。将大鼠固定于定位仪上，暴露颅骨，冠状缝后3～4 mm安置脑电电极，以不损伤硬脑膜为准；肌电电极由银丝制成，分别在左侧颈部浅、深肌层和右侧颈深肌层放置银质肌电电极；所有脑电、肌电电极均用磷酸锌黏固粉固定于颅骨表面，将脑电和肌电电极接到一插件上。术后大鼠自由活动，水食不限，分笼饲养于隔音、恒温(22±2）℃，人工光照(8∶00～20∶00)的实验室中。术后1 w开始记录大鼠的脑电及肌电。脑电和肌电信号通过数模转化器(PC30FA，Eagle Technology，Cape Town,South Africa)和放大器（Grass Instrument Division of AstroMed，Inc.，West Warwick，RI)后直接输入电脑中记录。 ??? 1.2? 腹腔注射用药物? 对照液为pH7.4的缓冲液(PBS)，AS101〔trichloro(dioxoethyleneO,O′) tellurate，Tocris bioscience，USA〕以pH7.4的PBS为溶剂，配置浓度 为0.5 mg/kg；储存于4℃。 任大鼠自由活动，对照组大鼠第1天连续记录8 h（8∶00～16∶00），第2天于同一时间给予PBS；AS101组大鼠注射PBS或AS101于下午1∶40开始，注射完毕后下午2∶00开始睡眠剥夺6 h，再连续记录6 h。 ??? 1.3? 睡眠觉醒周期? 以30 s为一分段时间,将睡眠觉醒周期分为：①觉醒期:以额枕叶引导出低幅快波脑电和明显的肌电活动为特征；② 非快眼动(NREM)睡眠期:以睡眠梭形波和高幅慢波为特征,肌电活动明显减少；③快眼动(REM)睡眠期:以低幅快波为特征,除偶尔有肌肉抽动外,无明显肌电活动。 ??? 1.4? 统计学处理? 所有数据用x±s表示，作同体实验前后比较的pairedt检验。 ??? 2? 结? 果 ??? 2.1? PBS对于大鼠睡眠觉醒周期的影响? 与正常大鼠相比，腹腔注射PBS的大鼠觉醒时间(WAKE)从(137.02±31.88）min到（155.23±31.91）min（P＞0.05），慢波睡眠时间（NREM）从（308.52±30.19）min到（291.58±30.67）min（P＞0.05），快眼动睡眠（REM）从（34.46±8.28）min到（33.19±6.77）min（P＞0.05）。见图1。 ??? 2.2? AS101对6 h睡眠剥夺大鼠睡眠反跳的影响? 与注射PBS缓冲液的大鼠相比，6 h睡眠剥夺后的大鼠腹腔注射AS101（0.5 mg/ml）后，觉醒时间增加从(172.37±36.84)min 到 (195±24.16)min（P＞0.05）,NREM减少从(133.1±24.66)min到(130