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临床医学论文-早期巨噬细胞激活和核因子-κB活性在深低温停循环肺损伤中的作用
????????????????? 作者:高波涛,郑景浩,徐志伟,刘锦芬,苏肇伉,丁文祥?
【摘要】? 目的 探讨早期巨噬细胞的激活和核因子kappa B (NF-κB)活性在深低温停循环(DHCA)肺损伤中的作用及其可能的作用机制。方法 通过DHCA幼猪模型的建立,采用免疫组化和ELISA方法,检测缺血—再灌注不同时段肺组织巨噬细胞的激活、NF-κB的表达以及炎性因子含量的变化来检验巨噬细胞激活和NF-κB活性在DHCA肺损伤中的作用。结果 NF-κB表达和炎性因子含量的变化与DHCA缺血-再灌注呈时间依赖性,且在DHCA缺血-再灌注1.5 h时NF-κB的表达达到高峰,此时肺组织的炎性细胞以巨噬细胞为主。结论 早期巨噬细胞的激活和NF-κB活性可能加重DHCA肺损伤的发生。
【关键词】? 核因子kappa B;深低温停循环;再灌注损伤
Abstract: OBJECTIVE To explore the role of early activity of macrophages and nuclear factor-kappa B(NF-κB) in deep hypothermia and circulatory arrest (DHCA) and also evaluates their possible effective mechanism.METHODS Twelve piggies were randomly divided into two groups. There were six piggies in each group,normal temperature cardiopulmonary bypass(CPB) and DHCA. Lung tissue and venous blood samples were collected from every pig to meassure the virances of NF-κB by immunohistochemistry and inflammatorys factor by ELISA at the six scheduled different time.RESULTS The expression of NF-κB and changes of inflammatory factor has correlation with time of ischemia reperfusion and reached their peak at 25 hours after ischemia reperfusion. Macrophages were the most abundant cells in pulmonary inflammatory cells. CONCLUSION The early activity of macrophage and NF-κB may play an important role in lung injury of DHCA.
Key words: Nuclear factor- kappa B; Deep hypothermia and circulatory arrest; Reperfusion injury
深低温停循环(deep hypothermia and circulatory arrest,DHCA)是新生儿和婴幼儿复杂先天性心脏病手术中常用的一种体外循环(cardiopulmonary bypass, CPB)技术,急性肺损伤是这些患者术后的重要并发症和死亡原因之一,然而其发生机制尚不十分清楚。我们通过建立DHCA模型,来探讨早期巨噬细胞的激活和核因子kappa B(NF-κB)活性在DHCA肺损伤中的作用及其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验模型的建立 健康幼猪12只,雌雄不限,体重(10.2±1.6)kg,2周龄,随机分为两组:对照组(常温并行循环组,n=6)和实验组(停循环组,n=6)。均常规行右房以及升主动脉插管,建立CPB。对照组并行循环180 min;实验组并行循环30 min后将体温降至22℃,然后停循环1 h,之后再灌注1.5 h。
1.2 标本采集 两组分别于并行循环前(T0)、并行循环30 min(T1)、90 min(停循环1 h,T2)、120 min(再灌注0.5 h,T3)、150 min(再灌注1 h,T4)、180 min(再灌注1.5 h,T5)6个时间点留取肺组织标本,用4%甲醛固定,以备做免疫组化定性测量NF-κB(Lab Vision公
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