自身免疫性肝炎患者血清中高迁移率族蛋白B1检测.DOCVIP

临床医学论文-自身免疫性肝炎患者血清中高迁移率族蛋白B1检测 ?????????????????? 作者：赵擎，辛绍杰，侯俊，胡燕，貌盼勇? 【摘要】? 　　目的 采用ELISA检测方法，初步探讨人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与自身免疫性肝炎(AIH)发病的相互作用关系。方法 将纯化的HMGB1蛋白，包被ELISA检测微孔板，检测AIH患者和健康献血员的血清分别165份和69份，分析比较AIH患者和健康献血员的血清中抗HMGB1抗体的分泌情况。结果 AIH患者血清中抗HMGB1抗体的阳性率明显高于健康献血员(78.7% VS 50.7% ，P0.05)。直线回归分析显示，抗HMGB1抗体滴度(OD值)与ALT水平有很好的相关性(相关系数r=0.968)。结论 HMGB1是AIH疾病发生发展中一个重要的炎症蛋白，与疾病的炎症活动程度有很好的相关性。 【关键词】? 高迁移率族蛋白B1 自身免疫性肝炎 ELISA 　　Abstract:　　Objective Adaption the method of ELISA, investigation the relationship between the human high mobility group box-1 protein (HMGB1) and autoimmune hepatitis (AIH). Methods Coating the microwell plate using purified HMGB1 protein, detection the serum of the 165 AIH and 69 healthy respectively. Comparison the level of Anti-HMGB1 antibody in AIH and the healthy. Results The positive ratio of Anti-HMGB1 antibody in AIH more than that in healthy (78.7% VS 50.7% ，P0.05), The linear regression analysis showed there were good correlation between the anti-HMGB1 antibody titer and the level of alanine transarninase(ALT) (correlation coefficient, r=0.968). Conclusion HMGB1 is a crucial inflammatory protein in the progressing of AIH, there are good correlation between the anti-HMGB1 antibody titer and the stage of inflammation in AIH. 　　Keywords:high mobility group box-1 protein （HMGB1）；autoimmune hepatitis（ AIH）；ELISA 　　血循环中自身抗体的检测是自身免疫性肝炎(AIH)诊断和分型的主要依据。但自身抗体的检测并不能完全排除其他原因引起的肝脏病变，药物性肝炎、病毒感染等也可产生相应的自身抗体[1]。高迁移率族蛋白 (HMG)是存在于真核生物细胞内的一类非组蛋白染色体结合蛋白[2]。研究显示HMGB1是p-ANCA的一种新型靶抗原分子，AIH患者体内抗HMGB1抗体的阳性率达89%;在p-ANCA阳性的AIH患者体内，抗HMGB1抗体的阳性率为96%，两者具有很好的相关性[3]。本实验将前期实验纯化所得的HMGB1蛋白[4]，包被ELISA检测微孔板，检测AIH患者的血清共计165份，分析比较AIH患者和健康献血员的血清中抗HMGB1抗体的分泌情况，初步探讨HMGB1蛋白与AIH发病的相互作用关系。 　　1　材料和方法 　　1.1　标本来源　收集302医院2002年至2006年临床诊断为AIH患者的血清共计165份，健康献血员的血清由302医院输血科提供。 　　1.2　主要试剂　人重组HMGB1蛋白，小鼠抗人HMGB1抗体购自美国Sigma公司。辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG，辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG由解放军302医院病毒研究室提供。显色液A液、B液、终止液购自北京科卫临床诊断试剂公司。枸橼酸盐缓冲液(0.01M pH6.0)，抗体稀释液，DAB Kit(20×)购自北京中杉生物技术公司。 　　1.3　ELISA试验步骤　将纯化所得HMGB1蛋白与CB包被液按1∶200的比例混匀，加入微孔板中，每孔加