金纳多（EGB-761）对大鼠肝脏细胞色素P450酶活性影响研究.pdf

全纳多对大鼠肝脏细胞色素P450酶活性影响的研究 金纳多对大鼠肝脏细胞色素P450酶活性影响的研究 中山大学药学院临床药理研究所 硕士研究生 马锦芳 导 师 黄民教授 中文摘要 function 人类细胞色素P450是存在于肝脏微粒体混合功能氧化酶系(mixed oxidase MFOS)，又称肝药酶或单加氧酶。对许多内源、外源性化合物 system 在体内的I相生物转化有重要作用，在药理学、毒理学研究中有着重要意义，尤 其对阐明药物．药物的相互作用，指导临床合理用药有重要的指导意义。在临床 用药中，有相当一部分的药物不良反应是由代谢性药物相互作用引起的。其发 生率占药代动学相互作用的40％，而且代谢性相互作用的96％是由P450酶系 介导的。总之，多数药物的代谢是整个CYP450酶系共同作用的结果，该酶的活 性受遗传、年龄、机体状态、营养、疾病、吸烟、饮酒等多种因素的影响。此 外，很多药物本身也能诱导或抑制CYP450的活性，如苯妥英、利福平诱导 诱导和抑制作用有着非常重要的理论和现实意义。首先了解药物对P450的诱导 或抑制能指导临床对现有药物的合理使用。根据药物对P450诱导或抑制的强 弱，适当的增加或减少用药量，避免不良反应的发生和因达不到治疗浓度而导 致的治疗失败。其次从分子生物学方面研究药物对P450的诱导或抑制还有利 于对肿瘤和其它一些疾病的发生、发展机制进一步探讨。了解P450对特定前致 癌物和前毒物的作用，有目的抑制它的活性或避免与其接触，这对降低肿瘤等 疾病的发病率有着重要的意义。最后用特征性探针药研究己知酶在某一底物代 谢过程中的作用，有助于进一步阐明药物代谢个体差异的分子基础，而且可为 指导临床用药个体化提供科学依据。 银杏在中国的药典中称白果，西方国家将银杏叶提纯物制成多种制剂，广 泛应用于临床。金纳多是德国舒培博士药厂生产的第四代银杏叶提取制剂，又 称EGB-761，有效成分是24％的总黄酮(ginkgo-flavoneglycosides)和6％的萜类 金纳多对大鼠肝脏细胞色素P450酶活性影响的研究 在自由基清除方面和抗脂质过氧化，萜类主要表现为血小板活化因子(PAF)的拮 抗作用和神经细胞的保护作用。盒纳多目前畅销德、法及世界许多国家，成为 当今改善脑及末梢血循环障碍的理想药物。随着人们生活水平的提高，植物药 以其肯定的疗效和几乎无副反应的优势而同益受到患者和医生的欢迎。目前金 纳多逐渐成为老年人最受欢迎的保健品之一。随着人口老龄化的日趋严重，金 纳多的适应症越来越广泛，成为老年人的常用药之一。而且随着医学与药学的 发展，大大促进老年人的多药并用。随之而来的药物相互作用也逐渐成为人们 关注的热点。目前有关该药对药物代谢酶影响的研究较少。所以，本实验通过 体内研究金纳多对肝脏P450酶活性的影响，查明其代谢所涉及细胞色素P450 同工酶，明确其作用及机制，为指导临床合理化用药提供科学依据，也可以预 测临床与其联用药物在体内可能发生的相互作用过程。因此既有重要的社会效 益，又有可观的经济效益。 本实验采用氯化钙沉淀法获得肝微粒体进行体外测定P450同工酶的活性， 该方法是经典的测定P450酶的方法，国内外均已有文献报道。该方法的优点 是，简便易行，适合所有由P450代谢的化学物质的代谢研究，排除其他因素的 干扰，直接观察酶对底物的选择性代谢，为整体试验提供可靠的理论依据。且 当一些对人体有较大损害的物质不适合进行整体试验时，该方法无疑是成为很 好的替代方法。 实验内容： 第一部分：金纳多(EGB．761)对大鼠肝微粒体P450酶活性的影响 目的： 响。 方法： 雄性SD大鼠按体重随机分为100mg／kg、60mg／kg、30mg／kg、15 mgg，5 mg／kg五个剂量组、正常对照以及阳性对照组。给药组分别根据体重将不同剂 量的金纳多(10mg／m1)连续灌胃5天，正常对照组给予2ml／只的生理盐水连