银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成及P16基因启动子甲基化的研究.pdfVIP

银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成 及P16基因启动子甲基化的研究 摘要 目的：研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成能力及其P16基因启动子甲基化 状态，并探讨两者之间的关系。 方法：密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞，培养于含 时计数高增殖潜能集落形成细胞(HPP—CFC)集落，然后收集集落。提取纯化 P16基 DNA，经亚硫酸盐修饰后，采用甲基化特异PCR(MSP)检测HPP．CFC 因启动子甲基化状态。 结果：(1)在甲基纤维素半固体培养基中，银屑病患者骨髓HPP．CFC集落数显 P16基 著低于正常人HPP．CFC，且集落形态较小；(2)正常对照骨髓HPP．CFC 因启动予甲基化阳性率较高，而银屑病患者骨髓HPP．CFCP16基因启动子甲基 化阳性率低于正常人。 结论：银屑病患者骨髓造血细胞有异常；银屑病患者骨髓HPP．CFCP16基因甲 基化降低可能与其相对较低的HPP．CFC集落形成能力密切相关。 关键词：银屑病： 高增殖潜能集落形成细胞：P16基因； ofthe and of P169ene Study colonyformingmethylation inbonemarrow-derivedHPP—CFC promotor of psoriaticpatients Abstraet cellsof the ofbonemagowlerived activity hematopoietic Objective：Toinvestigate the betweenthe statusofP16 and relationship methylation gene psoriaticpatients promoter mononuclearcellswere Methods：Bonemarrow—derived bydensity separated cellswerecultured．in bonemarrowmononuclear gradientcentrifugation．the for14 SCF，GM—CSF，IL-3andIL_6 semi—solidculturemediumwith methycellulose then potentialcolony—forming days，andhigh-pro