Bcl2和Bax基因在肺癌中的表达与其生物学行为相关性的研究.pdfVIP

中 文 摘 要 前 盲 肺癌是当今世界各国常见的恶性肿瘤之一，并已成为目前人 症而死亡的主要原因。被认为是当今世界上对人类健康与 生命危害最大的恶性肿瘤。目前我国肺疡占男性恶性肿瘤发病率 和死亡率的首位，女性发病率的第二位、死亡率的第一位。肺瘤的 防治问题，目益严峻地摆在了肿瘤工作者的面前。 导致肺癌发生的原因是多方面的，目前凋亡现象已成为医学 家们的研究热点，早在1967年Iversen等就提出，肿瘤不仅是细胞 增殖异常的疾病，而且是死亡异常的疾病，是增殖与死亡平衡失调 的过程。因此，肿瘤不仅仅是细胞增殖异常的结果，同时也与细胞 凋亡相关。现已知有多种癌基因参与肿瘤细胞凋亡的调控，尤其 是Bel一2基因和Bax基因，被认为与凋亡关系密切，前者为凋亡 抑制基因，后者具有抑制Bd一2促进细胞凋亡的作用。 Bd-2基因的发现使人们认识了一个新的肿瘤发生机制，在 细胞正常生长的情况下，Bel一2过度表达抑制细胞的凋亡过程， 引起细胞异常积聚，产生庙变。 sax基因作为凋亡调节墓因，目前研究不多，争议很大，从理 论上讲，在肿瘤中sax基因应为低表达，以减少凋亡的发生，但实 际检侧各家报道不一，为此我们对Bcl一2和Bax荃因在肺庙中的 赵与Ato学行为相关性进行了触。决- 本研究应用免疫组织化学法(5一P法)拉侧50例肺癌组织中 Bcl-2和Bax基因产物的表达水平及其与肺癌临床特征之间的 关系，以探讨Bel-2基因与Bax基因在肺癌发病中的作用。 实 验 材 料 一2000年3月一2000年5月，取辽宁省肿瘤医院病理科肺癌标 本50例，均为术后新鲜标本，每例取肿瘤组织一块，远离肿瘤组织 的正常肺组织一块，均为1x1cm，组织学类型按WHO标准分类， 组织病理分级和PTNM分期按国际抗癌联盟UICC标准。取材后 标本用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，制成3N.m切片，备用。 Bcl-2(c-2):二一7382购于美国SantaC二公司，Bax(B-9):ac -7480,S一P试剂盒、DAB底物试剂盒均购自北京中山生物技术 有限公司。 实 验 方 法 采用链菌素亲生物素一过氧化醉免疫组化方法(简称S一P 法)，步熟如下:石蜡切片常规二甲苯脱蜡，二甲苯10min2次，梯 度酒精水化，无水酒精5min2次，95%酒精5min,PBS液冲洗 5min,3次，396氏仇10min,PBS洗5min3次，10%山羊血清20min 加人一抗，一抗工作浓度为1:100,4℃过夜，PBS洗5min,3次，生 物素标记二抗45min,PBS洗5min3次，辣根酶标记链醉卵白素工 作液40min,PBS洗5min,3次，DAB显色1一3分钟，自来水充分 冲洗，苏木素复染、脱水、透明、封固。Bcl一2及Bax表达均以胞 浆呈清晰棕色为阳性，细胞浆无棕色或与背景着色一致为阴性。 统计学处理;xx检验。 实 验 结 果 1.肺癌组织中Bc】一2及Bax蛋白表达情况 ·2 · 我们检侧了50例肺癌标本，其中鳞癌24例，腺癌18例，小细 胞未分化癌3例，腺鳞混合癌3例，类痛2例;同时检测了上述50 例肺癌癌旁正常组织。结果Bcl-2蛋白在癌旁正常组织阳性率 为24%;腺癌为72.290，鳞癌为66.67%，其它为37.5%，在痛组 织中的表达显著高于癌旁正常组织，二者相比有显著性差异(z2= 16.23,p0.01).Bax蛋白癌旁正常组织中，阳性率为26%;膝痛 为44%,鳞痛为54.17%，其它为50%，二者相比有显著性差异(尹 二6.11,p0.05)。 2.Bcl一2及B。蛋白表达与癌分化程度的关系 我们主要研究了腺癌及鳞痛与分化程度的关系，其中Bcl-2 蛋白阳性率分别为腺癌:低分化组 “.67%，中分化组70%，高分 化组60%;鳞癌:低分化组80%，中分化组62.5%，高分化组63. 64%;各项相比，p0.05无显著性关联。Bax蛋白阳性率分别为 腺癌:低分化组33.33%，中分化组60%，高分化组20%;鳞瘤