cyclinA及其抑制物P27蛋白在肾癌中的表达及意义.pdfVIP

中文摘要 前 言 (.胞增殖分裂是细胞生物学最基本的问题，参与细胞周期调 控的分子包括细胞周期素(cycling)、周期素依赖性激酶(CDKs)、 周期依赖性激酶抑制剂(CKIs)，其核心机制是CDK活性的调控。 细胞周期素A(cyclinA)的高水平表达或其抑制因子(如P21, P27,P57等)的缺失，往往会引起CDK活性的改变，从而导致相应 几个控制点(checkpoint)的失控，使细胞获得转化生长的特性，在 DNA损伤没有得到修复的情况下由G:期进人S,q及M期，造成 遗传变异的积累，为肿瘤的发生、发展提供了分子基础。 据国外报道，cyclinA的高表达与肺癌、结肠癌、前列腺癌等 的病理及临床特征相关，而在肾癌中，cyclinA的表达水平与肿瘤 的病理分级、临床分期及预后之间的关系如何，目前尚存在较大分 歧;而P27在肾癌的免疫组化研究迄今未见报道J碌验通过免 疫组化方法和流式细胞技术，研究了cyclinA及其抑制因子P27 在 亘组织中的表达及其意义。 } 材料与方法 \采用肾癌石蜡包埋组织块66例J 肾组织35例为对照组。 免疫组化研究采用SABC法。结果判定标准:显微镜下观察， 按阳性细胞百分率计分:5%为0分，5%一50%为1分，50% 为2分;按染色强度计分:无着色为0分，弱着色为1分，强着色为 2分。将两项得分相加，0一1分者为(一),2一4分者为(+)。计 算相关系数时则直接利用阳性细胞百分率。 流式细胞术检测及资料分析:将肾癌标本制成单细胞悬液，应 用FACscan型流式细胞仪检测，以正常肾组织细胞为标准品调整 CV值在5%以内，每份样品上机检测1x100个细胞，采用CELL一一 QUEST软件对测得数据进行分析，依据DNA指数(DI)判定DNA 倍体:DI=1.0士2CV为2倍体，DI01.0土2CV为异倍体，另计算 S期比例(SPF)值=S/(Go/G,+S+G,/M)x100%o 统计学处理采用犷检验及t检验;通过计算相关系数r以及t 检验评价各指标之间的相关性。生存资料采用Kaplan一Meier生 存曲线进行比较分析。 结 果 免疫组化研究:cyclinA阳性染色部位主要为细胞核，也可见 于胞浆或胞核、胞浆共同染色;肾癌组织中阳性表达率为19.7%, 正常肾组织中为2.9% (P0.05);G2,3级肿瘤高于G,(P0. 05)，II一W期与I期、有/无淋巴结转移之间无显著差异 (P0. 05)oP27的阳性染色部位以细胞核为主，偶见于胞浆;肾癌组的 阳性表达率为31.8%，正常肾组织为62.9% (P0.01);G2.3级肿 瘤低于G,(P0.05)，11一N期与I期、有/无淋巴结转移之间均 无显著差异(P0.05)ocyclinA +)及cyclinA(一)的肾癌患者 术后5年生存率分别为15.4%和54.7%(P0.05);P27(+)及 P27(一)的肾癌患者术后5年生存率分别为66.7%和37.8%(P 0.05).cyclinA与P27阳性细胞百分比呈负相关，相关系数r 二一0.492(P0.05)。 流式细胞分析:肾癌组织的异倍体比例均值为58.2%,SPF均 值为8.7%ocyclirA(+)及cyclinA(一)患者的异倍体比例分别 为76.0%和53.8%(P0.01),SPF分别为17.2%和6.6%(P 0.01);P27(+)及P27(一)患者的异倍体比例分别为37.2%和 67.9%(P0.01),SPF分别为5.4%和10.2%(P0.01)。cycli- nA,P27阳性细胞百分比及cyclinA/P27比值均与SPF相关，r值 ·2 · 分别为0.602(P0.01)，一0.511(P0.01)和0.828(P0.01)0 讨 论 细胞周期控制点(checkpoint)是细胞周期循序进展的关键部 位，决定着DNA复制及细胞分裂的起始与完成两个方面。由细胞 周期蛋白(cyclins)、家族性蛋白激酶CDKs及其抑制因子CKI。组 成的cyclins一CDKs一CKIs系统共同构成了一个对细胞周期进行