HLADRB1等位基因与红皮病的相关性.pdfVIP

中文 摘 要 目 的 应用PCR一SSP技术对红皮病患者的HLA进行分析，找出国 人的红皮病易感HLA等位基因，分析其相关性。 / 一实 验 材 料 { 又红皮病患者31例，来自中国医科大学第一临床学院皮肤科门 诊就诊及住院的无血缘关系患者，其中男18例，女13例。年龄在 27一71岁。其中银屑病14例、非银屑病17例(药疹1例、脂溢性 皮炎1例、扁平苔鲜1例、系统性硬皮病1例、毛发红糠疹1例、湿 疹1例、疙疹样脓疙病1例，病因不明10例)。均符合红皮病的临 床诊断标准。 正常对照组336例，选自健康、无血缘关系献血员，性别与患 者组相当。以上两组均为中国北方汉族人群。 受试者取外周静脉血lmlo构椽酸钠抗凝后，一20℃保存至 使用。 方 法 采用快速盐析法提取全血中DNA，用200闪双蒸水将析出 DNA溶解，电泳检测其浓度及纯度。进行HLA一DRB1特异性扩 增，然后用2%琼脂糖凝胶，将扩增产物点样，按15v/cm稳压电泳 20min,紫外检测仪下观察，结果在相应的DRBI等位基因泳道中 见到清晰的DNA条带即为阳性 。 相对危险率(RR)按Woolf公式计算:RR=ad/be，等位基因 检出率用直接计数法。基因频率按Hardy一Weinberg定理，公式 各组间的等位基因分布差异用四格表进行卡方(xx2)检验，按Fish- er法计算确切P值，P值校正(PC)用Px被试验的HLA等位基因 数。 结 果 一、红皮病患者组和正常对照组HLA一DRBI等位基因比较 如下。红皮病患者组HLA一DRB1*1201,2等位基因频率明显高 于正常对照组(r=28.30,RR=8.69,P=0.000007,Pc0.001)， 有非常显著性差异;HLA一DRBI*0701等位基因频率患者组也 高于正常对照组，但经校正P值后无统计学差异(X2=5.402,RR 二4.115,P0.05,Pc=NS)。 二、将红皮病患者组根据临床表现分成银屑病型红皮病和非 银屑病型红皮病两组分别与正常组各基因频率进行比较，结果显 示银屑病所致红皮病患者组和非银屑病所致红皮病患者组HLA 一DRB1*1201,2等位基因频率均明显高于正常对照组(银屑病 所致红皮病患者组HLA一DRBI*1201,2:X2=7.516,P=0.011， RR=6.32;非银屑病所致红皮病患者组:HLA一DRBI*1201,2: X2=23.65,RR二11.06,P=0.00008,Pc0.01)。并且银屑病型 红皮病患者组其HLA一DRB1*0701:r=10.88,RR=8.56,P= 0.0044，有显著性差异。 三、将红皮病患者分为病因未明的特发性红皮病和继发性红 皮病两组，分别与正常组各基因频率进行比较，结果显示:特发性 红皮病和继发性红皮病患者组HLA一DRBI*1201,2等位基因频 率均明显高于正常对照组(特发性红皮病患者组其扩二12.56, RR=10.53,P=0.00285,Pc0.05;继发性红皮病患者组其X2= 12.77,RR二6.771,P=0.00162,Pc0.05)两组有显著性差异;并 且继发性红皮病患者组的HLA一DRBI*0701等位基因频率高于 正常对照组，其Xz二11.39,RR=7.133,P二0.003,Pc0.05，有显 著性差异。 讨 论 HLA系统定位于人的第6号染色体短臂的一个狭窄区域，是 人体内最复杂韵遗传多态性系统。由一群密切连锁的基因组成， 是人类主要的遗传标志，在免疫调控过程中发挥重要作用。HLA 一II类基因的第二外显子区核昔酸序列的高度变异性，决定了所 表达的抗原分子的多态性，也决定了HLA一II类系统免疫反应的 多样性和复杂性，其多态性检测在医学实践和科研中，特别是在与 疾病相关性研究中具有十分重要的意义。本文在国内外首次应用 PCR一SSP技术进行红皮病与HLA一DRBI等位基因相关性研究， 至今仅Econmidou于1985年对银屑病型红皮病与HLA一A,B,C 相关性进行了研