MMP2、MMP9在宫颈癌中的表达及意义.pdfVIP

中 文 摘 要 / 前 言 馆颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤。在宫颈癌中，有无盆腔淋 巴结转移生存率差距很大。因此，对宫颈肿瘤发生发展，浸润转移 机制及判断转移的新指标的研究日益受到重视。 MMPs(matrixmetalloproteinases)是一组结构中含有锌离子和 钙离子的蛋白质水解酶家族，迄今已发现17个成员。在人体正常 生理过程如胚胎发育，组织塑型中起着不可替代的作用;同时，也 具有重要的病理意义，与多种肿瘤的发生发展，浸润转移密切相 关。目前研究较多的是N型胶原酶，包括MMP一2,MMP一9两个 亚型，分子量分别72KD和92KD 究应用免疫组化SP法研 究它们在宫颈癌中的表达及意义 / 材 料 与 方 法 、一 、材料 收集自1996-2000年手术切除宫颈鳞癌标本36例，宫颈腺 癌6例，手术切除及门诊活检宫颈上皮非典型增生10例，因其它 原因全切子宫之正常宫颈组织10例为对照组。全部病例术前均 无放、化疗史。宫颈癌组年龄29至71岁，平均年龄45岁。宫颈 上皮非典型增生组平均年龄41岁，正常对照组平均年龄40岁，三 组年龄相比无统计学意义。组织学和病理学分级按 《妇产科学》 第五版规定标准，临床分期按FIG01995年修订的标准。其中高 分化16例，中分化17例，低分化9例。FIGOI期29例，其中Ia 7例、Ib22例;II期13例，IIa8例、11b5例。淋巴结转移组14 ·1 · 例，非转移组28例;肿瘤直径 〔3厘米24例，--3厘米is例。所 有标本均经福尔马林固定，石蜡包埋,5}tm连续切片。 二、主要试剂:(略) 三、方法，原理及操作步骤: 1.方法:MMP一2,MMP一9染色采用免疫组化SP法。 2.原理:利用抗原抗体特异性结合，采用生物素标记的第二抗 体与链霉菌抗生物素蛋白连接的过氧化物酶及基质色素混合液体 来测定组织和细胞中的抗原，研究组织或细胞中的抗原。 3.操作步骤:(略) 四、对照: 以PBS置换一抗作阴性对照，用己知MMP一2,MMP一9阳性 的乳腺癌做阳性对照。 五、结果判断: 用DAB显色，阳性表达为细胞浆呈棕色，阴性则胞浆胞膜不 着色。按细胞显色深浅及显色细胞比例综合评分。 实 验 结 果 MMP一2和MMP一9在正常宫颈组织，非典型增生及癌组织 中的表达:MMP-2和MMP-9在正常宫颈组织中无表达，宫颈上 皮非典型增生组为低表达，而在宫颈癌中为高表达。 1.肿瘤细胞阳性表达定位于细胞浆和细胞膜，染色阳性细胞 呈散在，片状或灶状分布，多位于癌巢边缘或管腔近旁。肿瘤基质 中以成纤维细胞染色阳性为主，部分血细胞，血管内皮细胞亦有阳 性反应。 2.MMP一2,MMP一9的表达与临床分期，组织学分级，肿物大 小无关。 3.MMP一2,MMP一9的表达与淋巴结转移呈正相关。 ·2 · 讨 论 MMPs(matrixmetalloproteinases)是一组结构中含有锌离子和 钙离子的蛋白水解酶家族，迄今已发现17个成员。MMPs的功能 主要有二，其一是几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质成分; 其二是使其它的MMPs激活，形成瀑布效应。在人体正常生理过 程如胚胎发育，组织塑型中起着不可替代的作用，同时，也具有重 要的病理意义，与多种肿瘤的发生发展，浸润转移密切相关。目前 研究较多的是N型胶原酶，包括MMP一2,MMP一9两个亚型，分 子量分别72KD和92KD。实验证明MMP一2,9在乳腺腺上皮瘤， 乳腺良胜增生疾病，大肠良性息肉，正常胃粘膜中均呈低水平表达 或阴性反应，而在乳腺，胃肠道，泌尿系等恶性肿瘤中表达增强。 成为各种恶性肿瘤的共同特征。本组实验采用免疫组化SP法对 正常宫颈组织，宫颈上皮非典型增生及宫颈癌中MMP一2,MMP- 9的