NaH交换抑制剂EIPA和心肌缺血预处理对再灌注心肌的影响.pdfVIP

中文 摘 要 目 的 比较Na/H+交换抑制剂(ethylisopropyl一amiloride,EIPA)和 心肌缺血预处理(ischemicpreconditioning,IPC)对心肌细胞保护效 果的关系。 材料与方法 / 交以Wi。大鼠为模型，开胸制备缺血再灌注模型，以3%戊巴 比妥钠(45-60mg/kg)腹腔注射麻醉后固定于鼠台，将针形电极 插人四肢皮下，连接心电图机，连续记录II导联心电 『。分离气 管，行气管插管，连接微型人工呼吸机行人工呼吸(吸室内空气， 通气量为2m/l100g体重，频率60一70次/分)。经左侧第3一5肋 间开胸，剪开心包，暴露心脏及左室表面血管，以肺动脉圆锥及左 心耳交界处的左冠状静脉主干为标志，用1/2圆4x10不锈钢圆 针，在左心耳下方2mm处穿人，用5/0线穿过左冠状动脉前降支 下方的心肌表层，在肺动脉圆锥旁穿出，将心脏放回原处，穿线后 稳定15分钟，取心电图正常者将28只大鼠随机分为3组:①缺血 /再灌注组(ischemia一reperfusiongroup,I/R组)缺血前20分钟经 静脉给予二甲基亚矾(DMSO)，然后持续阻断冠状动脉30分钟， 再灌注120分钟。)EIPA组缺血前20分钟经静脉给予EIPAI. 2mg/kg持续15分钟，阻断冠状动脉30分钟，再灌注120分钟。 ③缺血预处理组(ischemicpreconditioning,IPC组)缺血5分钟，再 灌注5分钟，重复3次，阻断冠状动脉30分钟，再灌注120分钟。 以下述三者为观察指标:①心肌梗塞面积(infarctsize,IS):各组于 再灌注120分钟后，将左冠状动脉前降支原位重新结扎，从下腔静 脉注人2%伊文斯蓝，待伊文斯蓝染色区(正常区呈蓝色)和非染 色区(缺血区呈白色)显示清晰后，立即摘除心脏，一20℃冷冻过 夜，作垂直于左室长轴连续环切，每片厚约2一3mm，然后将组织 切片完全浸没于1%三苯基四氮哇(tri户enyl一tetrazolium一chlo- ride,TrC)pH7.4的磷酸缓冲液中，于37℃恒温水浴孵育20分钟， 然后组织切片浸没于10%福尔马林固定液中以提高染色的对比 程度，TTC染色区(非梗死区呈红色)和非染色区(梗死区呈白 色)，然后放在2mm厚的玻璃片之间展平，用数码相机照相后，用 UniversalImagingMetaMorph全自动处理系统计算各部面积，以各 缺血区面积之和占各左室壁面积之和的百分比作为缺血范围(is- chemiczone,IZ);以各坏死区面积之和与各左室壁面积之和的百 分比作为坏死范围(necrosingzone,NZ);以各坏死区面积之和与 各缺血区面积之和的百分比反映IS.②血清肌酸激酶同工酶(CK 一MB):各组于再灌注120分钟后，从下腔静脉取血液4m1，待稍 凝固后，以200()转/分离心10分钟，分离血清，用日立7060型全 自动生化分析仪及配套CK一MB试剂盒测定血清CK一MB,③室 性心律失常友生率:连续心电图记录监测心律失常，室性早搏连续 10次以上且速率大于基础心率者为室性心动过速，记录频发室早 和室性心动过速发生的只数。 结 果 1.心肌梗塞范围变化:EIPA组和IPC组与I/R组相比，均显 著缩小I/R后的心肌梗塞面积(P0.01)。实验结果由表1可 知:I/R组、EIPA组、IPC组缺血范围无显著差异(p0.05)，而心 肌坏死范围和梗塞面积EIPA组、PC组都明显小于I/R组(p0. 01),EIPA组与IPC组无明显差异(p0.05)，说明缺血前给予 EIPA和IPC有助于缩小心肌梗塞面积。EIPA组 IS缩小51. 82%，IPC组IS缩小54.19%。 2.减少肌酸激酶同工酶(CK一MB)的释放:由表 1可知，各 组都给予缺血30分钟，再灌注120分钟，EIPA组和IPC组CK- MB均显著低于I/R组(P0.01)，说明在缺血前给予EIPA和缺 血预处理，可使再灌注时心肌酶释放减少近50%，而EIPA组和 IPC组之间无差异(p0.05)。 3.减少室性心律失常发生率:由表2可知，在缺血前给予El- PA和缺血预处理，可使缺血及再灌注期间，尤其是再灌注期间室