LEALargeExternalAntigen在非小细胞肺癌中的表达研究.pdfVIP

中文 摘 要 厂 前言 火肺癌作为一个世界性难题，严重地危害着人类的健康。近些 年来，由于生命科学的发展，对各种恶性肿瘤的研究已从传统的细 胞水平、分子水平发展到了基因水平的研究，并从根本上确认恶性 肿瘤本质上是一种由于癌基因的激活和抑癌基因的失活所引起的 遗传性基因病。 自1975年Kohler及Milstein创立杂交瘤技术以来，各种较为 特异性的针对肿瘤标志物的单克隆抗体已广泛应用于临床实践， 极大地推动了肿瘤诊断和治疗的研究。目前，应用能够识别肿瘤 抗原的单克隆抗体对肿瘤的早期诊断和监测复发已成为较为稳定 和理想的一种方法。已发现的单克隆抗体有许多，如GICA,搪链 Lewis抗原、等。1986年宋今丹教授等用大肠癌培养细胞系 CCL187免疫Balb/。小鼠获得了一株能分泌人大肠癌单克隆抗体 的杂交瘤细胞，将该单克隆抗体为命名为ND一1，其识别的抗原 命名为LEA(LargeExternalAntigen)。当时的研究结果表明除了 大肠癌外，其它细胞系都不表达LEA，其中包括几种肺癌细胞系如 HUT-23,A-549等。而在其它癌组织的表达情况国内外尚无报 道，LEA是否具有大肠癌的组织特异性，其规律如何有待进一步 的研究犷了 本研究采用 丝里C 和Wes LEA在 非小细胞肺癌的表达进行定性和定量研究。 / 材料与方法 :56例肺癌组织蜡块由中国医科大学第一临床医院病理 中心及沈阳军区总医院病理科提供。20例冰冻肺癌标本由中国 ·1· 一 一 - 种...， 一 一 . 医科大学第一临床医院胸外科提供。按常规处理。试剂:鼠抗人 单克隆抗体ND-1由中国医科大学细胞生物研究室宋今丹教授 惠赠;S-P免疫组化超敏试剂盒和DAB购自福州迈新生物公司; 碱性磷酸酶标记的马抗小鼠二抗(22301)购自北京中山生物公 司;其余试剂均为国产分析纯。仪器:电泳装置，紫外凝胶成像及 分析系统(GDS80C。型，美国UVP公司)。方法:WesternBlotting 检测LEA在正常肺组织中和非小细胞肺癌中的定量表达。免疫 组化，按S一P免疫组化试剂盒步骤进行。结果:免疫组化:高分 化腺癌与中低分化腺癌表达有明显差异，与分化呈正比。与鳞癌 的分化无统计学相关;WesternBlotting结果:ND一1单克隆抗体与 特异性的抗原LEA结合，然后再与相应的二抗和染色剂结合，显 示特异性条带。结果与免疫组化结果一致。统计学分析:用扩和 Ridit分析检验LEA的表达与非小细胞肺癌的临床病理特征的关 系。用SPSSforWindOWS.0统计分析系统分析数据。 结 果 1.免疫组化结果:在76例非小细胞肺癌中阳性结果为56 例，占73.7%，阴性结果20例，占26.307a。32例鳞癌中阳性为22 例，占68.8%。43例腺癌中，阳性为34例，占79.1%。x，统计分 析结果表明腺癌LEA的表达与鳞癌的LEA表达无显著差异。 Ridit统计分析表明肺腺癌高分化与中低分化之间的表达有显著 差异(U=2.52,P0.05)，随着组织分化的提高LEA的表达而 有所增高，与分化呈一种线性相关(表2、图1);肺鳞癌高分化与 中低分化之间无显著性差异，二者不呈线性关系(表2、图2)。与 年龄、性别等无关。 2.WesternBlotting结果:见图3。结果与免疫组化结果一致。 LEA的表达量随分化程度的增高依次增高。正常肺组织中微量 表达。